Derechos Sexuales

Southern Blot.
(A) El ADN a analizar se digirió con enzimas de restricción y luego separados por electroforesis en gel de agarosa.
(B) Los fragmentos de ADN en el gel se desnaturalizan con una solución alcalina y se transfirieron a nitrocelulosa una filtro de membrana de nylon o por transferencia, conservando la distribución de los fragmentos de ADN en el gel.
(c) El filtro de nitrocelulosase ​​incuba con una sonda específica. The location of the DNA fragment that hybridizes with the probe can be displayed by autoradiography. La localización del fragmento de ADN que se hibrida con la sonda se puede visualizar por autorradiografía
El norte de secante
Northern blotting is used for detecting RNA fragments, instead of DNA fragments. Northern blot se utiliza para la detección defragmentos de ARN, en lugar de fragmentos de ADN. The technique is called "Northern" simply because it is similar to "Southern", not because it is invented by a person named "Northern". La técnica se llama "Norte", simplemente porque es similar a la del "sur", no porque es inventado por una persona llamada "del Norte".
In the Southern blotting, DNA fragments are denatured with alkaline solution. Enla transferencia Southern, fragmentos de ADN se desnaturalizan con una solución alcalina. In the Northern blotting, RNA fragments are treated with formaldehyde to ensure linear conformation. En el secante del Norte, fragmentos de ARN se tratan con formaldehído para asegurar conformación lineal.
Western blotting Western Blot
Western blotting is used to detect a particular protein in a mixture.Western Blot se utiliza para detectar una proteína en particular en una mezcla. The probe used is therefore not DNA or RNA, but antibodies. La sonda utilizada es por lo tanto no ADN o ARN, pero los anticuerpos. The technique is also called "immunoblotting". La técnica también se conoce como "immunoblotting".
ARN dot blot y slot blot
This methods allows the rapid analysis of numerous smallsamples for the sequence of interest and is less time consuming than the gel electrophoresis methods. Este método permite el análisis rápido de numerosas pequeñas muestras de la secuencia de interés y consume menos tiempo que los métodos de electroforesis en gel. 'Dots' or 'slots' of RNA are made onto a filter using a manifold and the filter is then hybridised with a labelled probe. Los puntos 'o'slots 'de ARN se hizo en un filtro con un colector y el filtro se hibridó entonces con una sonda marcada. Partially degraded RNA can also be used with good semi-quantitative results. ARN parcialmente degradado también puede utilizarse con buenos resultados semi-cuantitativos. However, high false positive rates need careful use of appropriate controls Sin embargo, las altas tasas de falsos positivosnecesitan el uso cuidadoso de los controles adecuados
Protocol Protocolo
Reagents Reactivos

20 x SSC Standard saline citrate : 3 M NaCl, 300 mM tri-sodium citrate, pH 7.0.20 x SSC estándar salina citrato: 3 M NaCl, 300 mM de citrato trisódico, pH 7,0. Add 175.3 g of NaCl and 88.2g of tri-sodium citrate to 800 ml of water. Añadir 175,3 g de NaCl y 88.2g de tri-citrato de sodio a 800 ml deagua. Adjust the pH to 7.0 with 1M HCl and then add water to 1 litre. Ajustar el pH a 7,0 con HCl 1M y después agregar agua a 1 litro. Autoclave to sterilise Nitrocellulose / reinforced nitrocellulose or nylon membrane RNA loading buffer 1 x MOPS buffer (ie, 20 mM MOPS, 8 mM sodium acetate and 1 mM EDTA, pH 7.0), 7% (w/v) formaldehyde pH 4.0, 5% (v/v) sterile glycerol, 50% (v/v) deionised1 formamideand 0.025% (v/v) of saturated aqueous bromophenol blue solution 2 Autoclave para esterilizar nitrocelulosa / nitrocelulosa o membrana de nylon reforzado con carga de ARN tampón 1 x tampón MOPS (es decir, MOPS 20 mM, 8 mM de acetato sódico y 1 mM EDTA, pH 7,0), 7% (w / v), pH 4,0 formaldehído, 5% (v / v) de glicerol estéril, 50% (v / v) formamida deionised1 y 0,025% (v / v) de solución acuosa...