Desacoplantes

VERFICACION EXPERIMENTAL DEL BOMBEO DE PROTONES POR LEVADURAS. EFECTO DE LOS INHIBIDORES Y DESACOPLANTES DE LA CADENA RESPIRATORIA Y FOSFORILACION OXIDATIVA

RESUMEN
Se realizaron dos experimentos, en uno se adicionó un desacoplante (2,4 dinitrofenol), y en el otro un inhibidor (azida sódica), ambos comparados con un ensayo Blanco (sin inhibidor ni desacoplante). Inicialmente de cada uno semidió el pH, y con el pasar del tiempo, se midió nuevamente sus respectivos pH. El aumento de pH con relación al tiempo en el ensayo del inhibidor, fue un resultado no esperado, debido a que la acción de la azida sódica consiste en la inhibición de transferencia de hidrógeno a través del sistema citocromo, por lo que el pH a un tiempo determinado debió mantenerse; mientras que en el ensayo deldesacoplante, el aumento del pH fue debido a la acción del 2,4 dinitrofenol, que no afecta, o incluso acelera el transporte de electrones, pero impide la formación de ATP, y la disminución seguida del pH fue debido al aumento de hidrogeniones libres. Con esto, se puede comprobar experimentalmente el efecto de los inhibidores y los desacoplantes en el bombeo de protones en la cadena respiratoria yfosforilación oxidativa.
Palabras claves:Inhibidor, desacoplante, fosforilación oxidativa, cadena respiratoria

ABSTRACT
Twoexperimentswereconducted, onewasadded a desacoplante (2,4-dinitrophenol), and ontheotheraninhibitor (sodiumazide), bothcomparedwith a test target (free or desacoplante inhibitor). Initiallyforeach pH wasmeasured, and withthepassing of time, againmeasuredtheirrespective pH.Theincrease of pH value at the time in the trial of theinhibitor, was a resultnotexpected, sincetheaction of sodiumazideisinhibition of hydrogenatom transfer throughthecytochromesystem, so the pH at a given time shouldkeepWhile in the trial of the desacoplante, the pH increasewasduetotheaction of the 2,4 dinitrophenol, whichdoesnotaffect, orevenacceleratesthetransport of electrons,butpreventstheformation of ATP, and followedbythe pH decreasewasduetotheincrease of free hydrogenions. Withthis, you can checkexperimentallytheeffect of inhibitors and the desacoplantes in thepumping of protons in therespiratorychain and oxidativephosphorylation.
Keywords:Inhibitor, desacoplante, respiratorychain, oxidativephosphorylation





OBJETIVOS
General
Observar por medio de métodosexperimentales el efecto que tienen los inhibidores y los desacoplantes en el proceso de la cadena respiratoria.
Específicos
• Describir las vías metabólicas por las cuales la utilización de la glucosa produce cambios de pH.
• Determinar de que manera se relaciona la transformación de la glucosa por las enzimas de la levadura con los cambios de pH obtenidos.
INTRODUCCION

Verificación Experimental delBombeo de Protones por Levaduras
La molécula de glucosa representa la principal fuente de carbono y energía para la mayoría de las células. El ingreso del azúcar a la célula, que marca el inicio del catabolismo, es un proceso altamente regulado que varía de una célula a otra, dependiendo de sus funciones. En Saccharomyces cerevisiae, una levadura que requiere del aporte constante de glucosa paraprocesarla por las vías aeróbica o anaeróbica, la captación de azúcares es un proceso complejo en el que participan numerosos transportadores pertenecientes a una familia multigénica, compuesta por al menos 20 genes diferentes1.
La glucosa actúa como señal para la regulación génica de diversos procesos celulares. Una molécula cuyo gen es inducido por la presencia de este azúcar es la ATPasa deprotones (H+ATPasa, EC 3.6.3.6). Esta enzima se localiza en la membrana plasmática de S.cerevisiae, en donde participa bombeando protones del citoplasma al exterior para regular el pH intracelular que disminuye durante el crecimiento celular. A la par de que expulsa protones, esta ATPasa genera un gradiente electroquímico necesario para el ingreso de nutrientes a la célula, entre los que se incluye...