Descripci N General Del Plan De Trabajo
Se establece que para este proyecto de investigación comprendida para el período 2015-2016, durante la primera fase se realizará la búsqueda, selección yanálisis de la información documental que se utilizará como base para la elaboración del procedimiento que será aplicado para la validación del método de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo realutilizado para la identificación de desbalance metabólico en plantas. Además, se determinará cuál es el mejor diseño experimental para aplicarlo en las fases posteriores del proyecto de investigación,así como el método estadístico que se utilizará para el análisis de los datos resultantes al finalizar la experimentación. En esta misma etapa se realizará la adquisición de todos los equipos,reactivos e insumos necesarios para llevar a cabo las etapas posteriores de la investigación, y se tomarán las capacitaciones requeridas para el manejo apropiado de equipos.
Durante la segunda fase delproyecto se realizará el procesamiento de las muestras de tejidos vegetales y se estandarizará el método de extracción de ARN utilizando el sistema de extracción TRizol® Reagent, así como el método parala síntesis de ADNc a través del sistema ONE STEP superScriptTM. El material genético será preservado en refrigeración a una temperatura de -80 °C. De igual forma se efectuará el diseño de losoligonucleótidos para la amplificación selectiva de los genes usados como biomarcadores asociados al desbalance metabólico.
La tercera fase contempla el desarrollo, implementación y estandarización delmétodo de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real, para el desarrollo de esta fase se determinarán las condiciones ideales de concentración de oligonucleótidos y temperatura de alineamientorequeridas para el proceso de amplificación de los genes biomarcadores. Además, se realizará la secuenciación de los amplicones obtenidos durante el proceso de amplificación por reacción en cadena de...
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