Det. De Coliformes Filt. Por Membrana.Doc Subida Exitosa
PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA
ANALISIS MICROBIOLOGICO DE AGUAS
Profesora. Marcia Mendoza Beltrán
TRABAJO PRÁCTICO
DETERMINACION DE COLIFORMES
METODO DE FILTRACION PORMEMBRANA
Fundamento.
Este método se basa en la filtración de volúmenes adecuados de agua a través de una membrana filtrante con porosidad apropiada, que permita la retención de losmicroorganismos buscados.
Equipos y materiales.
• Equipo de filtración por membrana estéril.
• Membranas de acetato de celulosa o nitrato de celulosa de 47 mm de diámetro y poros de 0.45 um.• Pinzas de punta lisa y tijeras
• Probetas graduadas de 100 mls.
• Estufa de incubación a 35 ºC + o- 2 ºC
• Toallas de papel desechables.
Medios de cultivo y reactivos.• Agua destilada estéril
• Placas con agar cromocult
Procedimiento.
Abrir el paquete que contiene el filtro de membrana, tome el filtro de membrana con la pinza estéril y coloque elfiltro de membrana con la trama hacia arriba, sobre la frita o placa porosa del aparato.
Coloque con cuidado el embudo sobre el receptáculo y ajuste con cuidado y herméticamente sobre la base oreceptáculo.
Tome la muestra y agite fuertemente por unos segundos.
Mida el volumen de muestra apropiado usando una probeta estéril.
El agua potable se analizará filtrando 100 – 500 mls .
Vierta dentro delembudo del portafiltro y filtre, aplicando vacío, cierre la llave.
Enjuague con agua destilada estéril por 3 veces con 20 a 30 mls, aplicando vacío a través de la membrana.
Tras el enjuagado, sedesbloquea y retira el embudo.
Inmediatamente se retira el filtro de membrana con las pinzas estériles y se coloca sobre el medio de cultivo, con un movimiento de rotación para evitar que quede aireatrapado.
Incubar las placas en bolsas de plástico que contengan toallas de papel desechables humedecidas, con la tapa hacia arriba, a una temperatura de 35 + o – 0.5 ºC, durante 22 a 24 horas....
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