Detección de anticuerpos antivirales

Determinación de anticuerpos antivirales

Curso complementario de Virologia Complementaria

Introducción:
Uno de los problemas que se presenta al momento de trabajar con virus es su identificación, no solo este problema se presenta en el área de investigación, si no también se presenta el mismo problema en el área de salud publica, dado que los virus son responsables por grandes epidemiasque han ocurrido, para eso se debe de contar con una manera eficaz, sencilla, de poder identificar al virus.

Estos métodos para la identificación pueden ser, el análisis genomico, o también mediante un análisis proteico de las proteínas que se sintetiza, pero estos métodos son relativamente caros, y no son accesibles para todos, por lo cual se planteo otra solución, la cual consiste en laidentificación de los antígenos, que presenta el virus en su estructura. Pero no es del todo fácil esta identificación, dado que los virus pueden presentar una envoltura, lo que hace que la identificación de estos se dificulte. Otra forma de concluir si una persona ha sido o esta inoculada con un virus es la determinación de los anticuerpos antivirales.

Los anticuerpos antivirales son los anticuerposque se producen por las células B después que el virus ha sido reconocido por los linfocitos T y ha sido eliminado por los Macrofagos, estos anticuerpos pueden estar presentes en forma soluble o también pueden estar anclados a la membrana de las células, estos anticuerpos son los encargados de reconocer al virus en una futura infección y ordenar la activación del sistema inmune.

Antecedentes:Los métodos tradicionales para el diagnóstico serológico de las infecciones virales incluyen: la neutralización, la inhibición de la hemaglutinación (IHA) y la hemaglutinación indirecta (HAI). La confirmación serológica de una infección aguda por cualquiera de estas técnicas tradicionales esta dada por un aumento de cuatro veces o mayor en el titulo de anticuerpos cuando se emplean diluciones aldoble seriadas.



Desarrollo:

Una de las formas usadas para la detección de los anticuerpos antivirales, consiste en varias técnicas indirectas, las cuales consiste en la detección de anticuerpos específicos antivirales por técnicas inmuologicas; son aquellas técnicas que reconocen la respuesta inmune por parte del organismo huesped, solo se concentra en el análisis y el estudio delhuésped, mas no en el análisis del virus directamente.

En los últimos años se han desarrollado nuevos métodos para la detección de anticuerpos virales, y en muchos casos han demostrado ser mejores que las pruebas tradicionales en términos de economía, sensibilidad, especificidad y rapidez.

Metodos:

1. Inmunofluorescencia Indirecta IFI:
La IFI, es un método rápido y confiable para ladeterminación de anticuerpos antivirales en el suero del paciente. Se basa en la unión de anticuerpos antivirales presentes en el suero del paciente a los antígenos virales expresados en la superficie y citoplasma de células infectadas, que han sido fijadas a un portaobjeto de vidrio. Como control de especificidad se usan células no infectadas.

El procedimiento es el que sigue: Se incuba el suero delpaciente con las células infectadas y no infectadas. Luego se realiza un lavado con PBS y se agrega posteriormente anticuerpo anti IgG humana conjugada con isotiocianato de fluoresceína. El isotiocianato de fluoresceína es una sustancia que se vuelve fluorescente a la exposición de la luz ultravioleta y emite una luz verde característica. El conjugado se unirá a los anticuerpos del paciente si lareacción es positiva, leyéndose la prueba en un microscopio de fluorescencia. La presencia de Ac se evidencia por la aparición de fluorescencia en el citoplasma y superficie de las células infectadas, mientras que las células control no fluorescen.

Es una prueba de diagnóstico serológico que tiene dos variedades principales: a) Inmunofluorescencia directa (IF) aplicada fundamentalmente a la...