Detecci n de alcohol en sangre

Detección de alcohol en sangre

Primeramente se realizó una venopunción a la víctima y el presunto culpable.
Para la extracción se colocó el brazo con inclinación y se siguió el protocolo establecido por el Instituto de Diagnóstico y referencia Epidemiológicos “Dr. Manuel Martínez Báez” (INDRE), la muestra de sangre se recolecto en tubos con EDTA (ácido etildiaminotetraacético) comúnmenteconocidos como tubos de tapa color lila, se requirieron tomar 5 mL de sangre a la víctima y al presunto culpable, es recomendable sean tomados unos cuantos mililitros más para ulteriores repeticiones y resguardo para posible repericias como contraprueba solicitadas por la judicatura.
Inmediatamente después de tener las muestras biológicas y estar debidamente rotuladas con los datos correspondientesen cada tubo, se destinaron 3 ml para realizar la prueba presuntiva por la técnica de Conway y los 2 mL restantes se conservó a una temperatura de 4°C para realizar la prueba confirmatoria cuali_cuantitativa de cromatografía gaseosa con detector de ionización de llama en su variante técnica denominada espacio-cabeza (head space).
Se procedió a realizar el análisis presuntivo de etanolmediante la técnica de microdifusión se colocaron 2 mL de reactivo de Anstie (se describe su preparación en anexo 1) en el compartimento central de la cámara de Conway, seguido de esto se extendió 1 mL de la muestra problema en el compartimento externo de la cámara y finalmente se le agrego 1 mL de carbonato de potasio saturado por encima de la muestra y se mezcló perfectamente. Una vezcompletado el proceso se procedió a tapar la cámara y dejar reposar por 1 hora a temperatura ambiente.
Esta técnica es de mucha utilidad para un estudio presuntivo, es un sistema cerrado en el cual el etanol es separado de la matriz biológica, mediante la acción de calor y un agente liberador (carbonato de potasio), para ser absorbido, en otro compartimento de la cámara de Conway, donde el etanolreacciona con una solución ácida de dicromato de potasio (reactivo de Anstie) mediante un proceso de óxido
-reducción, para dar una serie de colores que van del amarillo (color original del reactivo) que nos indica que no hay reacción, al azul, dependiendo de la cantidad del etanol que se encuentre en la muestra.






PRUEBA CONFIRMATORIA CROMATOGRAFÍA GASEOSA CON DETECTOR DE IONIZACIÓN DE LLAMALos procesos cromatográficos tienen lugar como resultado de repetidas adsorciones y desorciones durante el movimiento de los componentes de la muestra a lo largo de la fase estacionaria, alcanzándose la separación gracias a las diferencias en los coeficientes de distribución de los distintos componentes de la muestra. La grabadora registra gráficamente una curva para cada uno de los compuestosen estado gaseoso, los cuales son separados en la cromatográfica, a un tiempo específico de retención. La cromatografía como técnica analítica instrumental es capaz de proporcionar información tanto cualitativa como cuantitativa acerca de la composición de la muestra.
En nuestro caso la muestra es líquida (la sangre) y el etanol/metanol es volátil (para ello se calentó la sangre). Se realiza laseparación de estos compuestos de la sangre para optimizar su determinación en el análisis.

Cada muestra de sangre tanto de la víctima como del presunto culpable se preparó con previa agitación para homogeneizar, colocándose en un frasco de vidrio de 10 ml de capacidad perfectamente limpio, agregándose lo siguiente:
1 ml de sangre entera.
1 ml de n-propanol 1g % (o preferentemente Pert-butanol para muestras postmortem como estándar interno).
1 ml de solución saturada de carbonato de potasio (K2 CO3) como agente liberante.

A continuación se colocó un tapón de goma colocado como cierre del recipiente, y sellado herméticamente con aluminio. Posteriormente se colocó durante 30 minutos en un baño termostático a 50ºC y enseguida de esto se dejó enfriar a temperatura ambiente....