Deterinacion de tgo

Práctica N° 7

= Determinación de la Transaminasa Glutámico Oxalacética (TGO) Aspartato Amino Transferasa (ASAT) por el método UV cinético contínuo =

Competencia: Determina la actividadenzimática de la Aspartato Amino Transferasa en una muestra de suero sanguíneo.

Fundamento: La Aspartato Amino Transferasa (ASAT) presente en la muestra cataliza la transferencia del grupo amino delL-aspartato al 2-Oxoglutarato en presencia de la vitamina B6 y a un pH de 7.4 para formar Oxalacetato y Glutamato. El Oxalacetato formado, en presencia de la coenzima NADH + H+ y de la enzima MalatoDeshidrogenasa (MDH) es reducido a L-Malato y NAD+.
La LDH se incluye en el reactivo para convertir el piruvato endógeno de la muestra a Lactato durante la fase anterior a la medición.

IntroducciónProcedimiento

1.- Se realiza la toma de muestra

2.- Se centrifuga la muestra y se obtiene suero.

3.- Se rotula un tubo de ensayo con la letra M (muestra).

4.- Al tubo M se le coloca1.0 ml de reactivo de trabajo para ASAT

5.- Después se le agrega 0.1 ml de suero.

6.- Se mezcla e incuba durante 1 minuto a 37°C.

7.- En tiempos cronometrados de 60 segundos leer la muestraa 1’, 2’ y 3’ en el espectrofotómetro, manteniendo una temperatura de 37°C.

Cálculos
Actividad en U/L de la ASAT en U/L=  (delta) As/minuto * factor

Cuestionario

1.- Cual es laimportancia clínica de la TGO en el diagnostico clínico?
Se utiliza para evaluar problemas o alteraciones del hígado. Su elevación es directamente proporcional al daño celular y puede servir como indicativo dela evolución de la enfermedad. También se utiliza como parámetro indicador de lesión cardiaca en el contexto de otros parámetros cardiacos (CPK, LDH), como indicador de lesión cardiaca por uninfarto de miocardio.

2.- Mencione dos alteraciones que producen un aumento de esta enzima en sangre.
Hepatitis alcohólica aguda
Obstrucción de las vías biliares

3.- Indica otros métodos de...