Determinación de anticuerpos



























Streptococo pyogenes
Este microorganismo expresa el Antígeno grupo A que es un dímero de N-acetilglucosamida y de ramosa en sus paredes celulares, pudiendo ser o no encapsulado por lo que es resistente a la fagocitosis, mismo que posee varías exotoxinas, siendo un microorganismo no esporulado
Está envuelto por una cápsula de ácido hialurónicoque retarda la fagocitosis por parte de polimorfonucleares y macrófagos.
La inmunoglobulina A (IgA) es la clase predominante de anticuerpo en las secreciones seromucosas del organismo como saliva, lágrimas, calostro, leche y secreciones respiratorias, gastrointestinales y genitourinarias. En sangre, se encuentra como una molécula monomérica, pero en las mucosas se encuentra en forma dimérica.Actúan como la defensa inicial contra los patógenos invasores (virus y bacterias) antes de que penetren en el plasma; identifican los antígenos patógenos e impiden que se instalen en las mucosas.
La IgA tiene una masa molecular que oscila entre 170.000 y 720.000.
El análisis de IgA mide el nivel de inmunoglobulina A en la sangre, uno de los anticuerpos más comunes del organismo. La IgA tambiéndesempeña un papel en las reacciones alérgicas. En las personas sensibles, los niveles de esta proteína se elevan en respuesta a la presencia de alérgenos, como el polvillo que desprenden las mascotas. Los niveles de IgA también pueden ser elevados ante la presencia de enfermedades autoinmunes, trastornos en los cuales el cuerpo crea anticuerpos, erróneamente, para combatir tejidos sanos.
Elanálisis de IgA ayuda a los médicos a diagnosticar problemas del sistema inmunológico, los intestinos y los riñones. También se utiliza para evaluar las enfermedades autoinmunes, como la artritis reumatoidea, el lupus y la enfermedad celíaca. Los niños que nacen con niveles bajos de IgA (o sin la proteína) tienen mayores riesgos de desarrollar una enfermedad autoinmune.
HIBRIDOMA: TÉCNICA DEIDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES: TÉCNICA DE PRODUCCIÓN
El procedimiento para producir anticuerpos monoclonales demora, habitualmente, cuatro meses. Para ello, se inyecta en ratones el antígeno (En este caso S. pyogenes), aun cuando no esté puro. Luego de un período de espera que permite un aumento de los linfocitos B específicos, se sacrifica el ratón y se extrae el bazo, rico en linfocitosFIGURA No 1: PRODUCCIÓN DE UN ANTICUERPO MONOCLONAL
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Como primera etapa, los linfocitos que se obtengan del bazo, se mezclan con células mielomatosas (células de un tumor de linfocitos), agregando además polietilenglicol, un agente que facilita la fusión. Con esto se consigue que algunas células mielomatosas se fusionen con linfocitos del bazo, produciendo lo que se llama un hibridoma. Selogra así una célula que combina la capacidad de producir anticuerpos de los linfocitos, con la capacidad de multiplicarse indefinidamente de la célula mielomatosa. No todas las células logran fusionarse (hibridizarse), sino que por el contrario, un escaso número de ellas (sólo una cada 2 x 105 de las células del bazo). De allí que sea necesario eliminar todas aquellas células que no se fusionen(linfocitos y células mielomatosas). Los linfocitos que no se han fusionado se eliminan solos, porque luego de unas pocas divisiones, mueren. El problema más complicado es eliminar las células del mieloma, que si continúan multiplicándose. Las células mielomatosas que se utilizan para la fusión han sido genéticamente alteradas, de modo que les falta una enzima vital para la síntesis de DNA: lahipoxantina guanina fosforibosil transferasa. Cuando estas células mielomatosas mutadas se hacen crecer en un medio de cultivo especial, ellas también mueren. Sin embargo, si se logran fusionar con linfocitos normales, sobreviven, porque los linfocitos le proveen la enzima que a ellas les falta. De este modo, al poco tiempo, en el cultivo sólo quedan las células fusionadas (hibridomas). Luego debe...