Determinación de azúcares reductores. método de somogyi- nelson

Grado en Ciencia y Tecnología de los alimentos
Asignatura: Biología

PRÁCTICA 1: DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES. MÉTODO DE SOMOGYI- NELSON

INTRODUCCIÓN

La determinación de azúcaresreductores mediante el método de Somogyi-Nelson se basa en la capacidad de estos azúcares para reducir agentes oxidantes suaves como el Cu2+.. El Cu2+ se reduce a Cu+, y en presencia de arsenomolibdatoamónico forma un complejo de color azul, a partir del cual podemos conocer mediante espectrofotometría la cantidad de cobre reducido, y por lo tanto, de azúcar reductor.

MATERIALES

Reactivode Somogyi I
Reactivo de Somogyi II
Glucosa de 500 ppm (Sol A)
Reactivo de Nelson
12 Tubos de ensayo (de tapa roscada)
Vaso de precipitados 25 ml
Vaso de precipitados 50 ml
Probeta 25 mlPipeta automática 1 ml
Pipeta automática 5 ml
Agua destilada
Tres muestras problema (A, B, C)
Espectrofotómetro
Agitador de tubos o vórtex
Cubeta
Incubadora

PROCEDIMIENTOPara empezar, preparamos las muestras problema para realizar el experimento. Primero preparamos el Reactivo 1, compuesto por Reactivo de Somogyi I y Reactivo de Somogyi II mezclados en proporción4:1. Para ello mezclamos con ayuda de las pipetas automáticas 19,2 ml de Somogyi I con 4,8 ml de Somogyi II, hasta alcanzar un volumen final de 24 ml aproximadamente (dos por cada tubo de ensayo).Para continuar, mezclamos por duplicado 2 ml de cada muestra problema con 2 ml de Reactivo de Somogyi (anteriormente creado), homogeneizamos las disoluciones con ayuda de un vórtex y las incubamos enun baño de agua hirviendo durante 15 min. Una vez transcurrido ese tiempo, dejamos enfriar y añadimos 2 ml de Reactivo de Nelson y 4 ml de agua destilada. Homogeneizamos la nueva disolución yevaluamos la absorbancia de cada muestra mediante un espectrofotómetro a una longitud de onda de 540 nm. Una vez sometidas las muestras problema a la espectrofotometría obtenemos los siguientes resultados:...