DETERMINACIÓN DE CREATININA EN ORINA

DETERMINACIÓN DE CREATININA EN ORINA
La creatinina es un compuesto orgánico generado a partir de la degradación de la creatina. Es un producto de desecho del metabolismo normal de los músculos quese elimina casi exclusivamente por medio de la filtración renal. Su determinación en suero, así como el aclarado (depuración de creatinina endógena), constituyen parámetros importantes para eldiagnóstico de diversas afecciones renales. Si la función renal es anormal, sus niveles se incrementan en la sangre, debido a que se elimina menos creatinina a través de la orina. Los niveles de creatininatambién varían de acuerdo con la talla y la masa muscular de una persona.
Fundamento:
La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) produciendo un cromógeno naranja más intenso conla muestra de orina que la del plasma (previa desproteinizaciòn con ácido pícrico). Por otra parte, se ha demostrado que los cromógenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte de las técnicasconvencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la reacción. De manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción, el incremento de color se debeexclusivamente a la creatinina.
Reactivos usados:
Sustrato: orina diluida 1:50.
Reactivo 1: solución de ácido pícrico 12.7 mmol/L y laurilsulfato de sodio 8.4 mmol/L.
Reactivo 2: solución de borato 53mmol/L e hidróxido de sodio 970 mmol/L.
Reactivo de trabajo (previamente preparado listo para la práctica de laboratorio): de acuerdo al volumen de trabajo, mezclar cuatro partes del reactivo 1 y unaparte de reactivo 1.
Estándar: solución de creatinina 20 mg/L.
Técnica:

B
S
Do
Desproteinizado
-
-
-
Estándar
-
0.5 ml
-
Orina diluida
-
-
0.5 ml
Agua destilada
1 ml
0.5 ml
0.5 ml
Reactivo 1
2 ml2 ml
2 ml
Reactivo 2
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml

Mezclar por inversión. Incubar a Tº ambiente por 20 minutos.
Calibrar con agua destilada.
Leer a 510 nm.


Cálculo:


Donde:
F: factor de calibración (F...