DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS. TITULACIÓN DE ANTISUEROS.


DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS. TITULACIÓN DE ANTISUEROS.

1.- INTRODUCCIÓN

La determinación del grupo sanguíneo es una práctica habitual e imprescindible para la transfusión de componente hemáticos. La razón está en que el sistema inmune de algunos individuos rechaza los hematíes de otros. Esta reacción inmunológica está mediada por anticuerpos y es fácilmente visualizable in vitromediante reacciones de aglutinación. Se conocen más de 20 grupos de antígenos eritrocitarios codificados en otros tantos loci génicos, para los cuales existen múltiples variantes alélicas. El resultado son más de 200 antígenos eritrocitarios identificables. Estos antígenos varían en su inmunogenicidad. Los más importantes a efectos transfusionales son los antígenos del sistema H / ABO y losdel sistema Rhesus (Rh).

Sistemas H y ABO

Los epítopos responsables son carbohidratos que aparecen en glicoesfingolípidos de membrana y también en glucoproteínas. El gen H codifica la enzima fucosil transferasa, que adiciona fucosa a una cadena oligosacarídica precursora. Los tres últimos azúcares de la cadena se denominan antígeno H (Figura 1). En un locus aparte está el sistema ABO, contres alelos. El alelo A codifica una transferasa que une N-acetil galactosamina a la cadena H, mientras que el alelo B codifica una transferasa que une una galactosa. El alelo O no produce transferasa y por tanto no modifica la sustancia H. El azúcar unido al carbono 3 de la galactosa determina la actividad antigénica. La galactosa no acepta azúcar en el carbono 3 a no ser que haya fucosaunida al carbono 2.




Figura 1.

Es importante destacar que estos genes son codominantes. Los individuos que expresan los alelos A y B tendrán oligosacáridos con los dos tipos de modificaciones. Así, se distinguen 4 grupos: A, B, AB y O. La importancia transfusional de estos antígenos radica en que los individuos de un grupo sintetizan anticuerpos frente a los oligosacáridos que no están ensus hematíes (Tabla 1). Estos anticuerpos, que se denominan isoaglutininas y que suelen ser IgM, aparecen en grandes cantidades en circulación sin necesidad de exposición previa a sangre de otros grupos. La razón parece estar en la reactividad cruzada de sustancias presentes en bacterias de la flora intestinal.

Tabla 1
Grupo sanguíneo
Genotipo
Antígenos eritrocitarios
Anticuerpos séricosA
AA, AO
A
Anti-B
B
BB, BO
B
Anti-A
AB
AB
A y B
-
O
OO
H
Anti-A, Anti-B


Sistema Rhesus

Se han identificado más de 40 antígenos del sistema Rh aunque no se sabe cuantos genes son responsables de este sistema. Son proteínas integrales de membrana con un contenido lipídico alto. D es el antígeno Rh más inmunogénico y por tanto el más importante a efectos transfusionales. Lapresencia de D da lugar al Rh+, mientras que la ausencia (d) da lugar al Rh-. Los anticuerpos anti D, que son IgG, aparecen en la circulación de los individuos Rh- sólo tras una exposición previa a sangre D, por ejemplo por una transfusión de hematíes o tras la gestación de un feto D.

Determinación de antígenos eritrocitarios y anticuerpos séricos

Antes de una transfusión se analizan loseritrocitos del receptor para ABO y D mediante antisueros anti-A, anti-B y anti-D. Simultáneamente se analiza el suero para detectar anticuerpos contra antígeno eritrocitarios (isoaglutininas), mediante hematíes A y B previamente tipados. Las reacciones positivas dan lugar a la aglutinación de los hematíes. Para asignar un grupo sanguíneo, ambas pruebas deben dar un resultado coincidente. Losresultados discrepantes deben analizarse cuidadosamente. Un test adicional es la prueba cruzada, que examina la compatibilidad entre suero del receptor con los hematíes del/los donantes. Para ello, hematíes lavados del donante se mezclan con suero del receptor, se incuban, se centrifuga y se examina para hemólisis y aglutinación

2.- OBJETIVOS

Al finalizar la práctica el alumno será capaz...