Determinación De Microbiología Diferencial (Nmp)

Determinación de microbiología diferencial (NMP)
NOM-003-ECOL-1994

Introducción
La siguiente práctica fue realizada con bases en la Norma Oficial Mexicana NOM-003-SEMARNAT-1997 que establece loslímites máximos permisibles de contaminantes para las aguas residuales tratadas que se rehúsen en servicios al público. Con el objetivo de proteger el medio ambiente y la salud de la población.Material y reactivos
Medio caldo lactosado o verde brillante
Medio EMB
Agua destilada
Muestra de agua residual
Tubos de ensayo con taparosca
Campanas Durham
Vaso de precipitado
Matraz erlenmeyerPipetas de 10 y 15 ml
Espátulas
Balanza o pesa digital
Autoclave

Método
Preparar 250 ml de caldo lactosado.
Preparar 10 g de caldo verde brillante a 250 ml.
Distribuir 10 ml de caldolactosado en tubos de ensayo con taparosca y campanas Durham.
Esterilizar a 121 ºC a 15 o 20 minutos.
Realizar técnica de cultivo NMP.

Desarrollo
1. los 250 ml del caldo verde brillante secalentaron hasta ebullir utilizando una parrilla eléctrica convencional.
2. se distribuyeron cantidades iguales de caldo verde brillante en 10 tubos de ensayo con taparrosca y se dejaron enfriar en elrefrigerador durante 48 horas hasta la próxima clase.
3. los 10 tubos de ensayo con el caldo verde brillante que se encontraban en el refrigerador se esterilizaron en la autoclave, a excepción de 3tubos que presentaban nata en el interior del caldo.
4. posterior mente se realizo una dilución seriada toando en cuanta lo siguiente:
➢ 10 ml de muestra en 90 ml de agua destiladarealizando una dilución de trabajo de 1.0 ml del cual se toman 5ml en 2 tubos de ensayo con una concentración de 0.1 ml de muestra, 1 ml en 2 tubos de ensayo con una concentración de 0.01 ml de muestra y3 gotas en 2 tubos de ensayo con una concentración de 0.001 ml de muestra.
5. los 10 tubos de ensayo con el caldo verde brillante y las muestras de río de 5 ml y de 1 ml se introducen en la...