Determinación De Proteínas
El nitrógeno de las muestras se digiere con ácido sulfúrico caliente más un agente catalítico que favorece la reacción convirtiendo todo el nitrógeno orgánico einorgánico a nitrógeno amoniacal. El amonio se libera al agregar un álcali y destilar la muestra por arrastre de vapor en ácido bórico; con el cual forma los iones amonio y borato. La titulación seefectúa con un ácido estandarizado que en forma indirecta proporciona el contenido de nitrógeno. Su análisis se efectúa mediante el método de Kjeldahl.
MATERIAL | EQUIPO | REACTIVOS |Matraces Kjeldahl de 500 mL | Unidad de digestión y destilación Kjeldahl. | Oxido de mercurio, grado reactivo. |
Pizeta de 500mL | Sulfato de potasio o sulfato de sodio anhidro,grado reactivo. |
Matraces Erlenmeyer de 250 mL | Ácido sulfúrico (98%), libre de Nitrógeno. |
Parafina. |
NaOH al 50% |
Perlas de ebullición | Ácido bórico al 2%|
Solución indicadora |
HCl al 0.1N y Na2CO3 |
Preparación de reactivos:
NaOH al 50%: Disolver 500 g de hidróxido de sodio y tiosulfato de sodio al 5 %; disolver 50 g de tiosulfatode sodio en agua y diluir a 1,000 mL
Ácido bórico al 2 %: Disolver 20 g de ácido bórico en agua y diluir a 1,000 mL
Solución indicadora: solución con 0.2% de rojo de metilo y 0.2% azul demetileno.
HCl al 0.1N: Suponiendo que la pureza del HCl comercial a utilizar presenta una pureza del 37%. Medir 8.3mL de HCl concentrado y adicionarlo a un matraz aforado de 1lt y aforar con aguadestilada, posteriormente valorarlo con Na2CO3.
METODOLOGÍA:
1.- Pesar 2 g de muestra (desengrasada) y colóquelo en el matraz Kjeldahl.
2.- Agregar 10g de sulfato de potasio, 0.7g de óxido de mercurioy 25 mL de ácido sulfúrico concentrado.
3.- Colocar el matraz en el digestor en un ángulo inclinado y calentar a ebullición hasta que la solución se vea clara, continuar calentando por 30min más....
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