Determinación de quinina en agua tónica mediante Fluorescencia molecular

P-3. Determinación de quinina en agua tónica mediante
Fluorescencia molecular
INTRODUCCION Y OBJETIVOS
Objetivo: Determinacion de un compuesto fluorescente (quinina) que se adiciona a las bebidas carbónicas especialmente al agua tónica, empleando la técnica de espectroscopía de fluorescencia molecular.
Introducción:
La quinina es un alcaloide derivado de la corteza del árbol de la quina,es un antipirético y fue el único remedio conocido para la malaria hasta el desarrollo de fármacos sintéticos.
La quinina se emplea como patrón en espectroscopia de fluorescencia ya que presenta un elevado rendimiento cuántico de emisión. Por otra parte, se utiliza como aditivo en bebidas carbónicas (agua tónica) a la cual confiere ese típico sabor amargo. En el agua tónica comercial la quininaestá comprendida entre 25-80 ppm. El control de este aditivo resulta de gran importancia, dada su toxicidad, catalogada en dosis mínima letal en ratas de 500 mg/Kg de peso. La cantidad de quinina en estas muestras puede cuantificarse empleando un método fluorescente.
PARTE EXPERIMENTAL
1- Partiendo de una disolución de 10ppm preparar 25ml (matráz aforado)de las disoluciones del calibrado: 1, 0.8,0.6, 0.4, 0.2 mg/L enrasando con acido sulfúrico 0,05M.
2- Con la adicion de 1 obtenemos los espectros de exitacion y de emisión de la quinina. Para ello seleccionamos en el monocromador de exitacion una λ=348nm, rendijas 5/5 y medir el espectro de emisión entre 400 y 600 nm. Fijamos en el monocromador de emisión la λ q la que se obtiene una intensidad máxima y medimos el espetro de exitacionentre 300 y 400 nm.
3- Fijamos la λexc máxima y medimos los espectros de emisión para todas las disoluciones del calibrado, comenzando con la mas diluida. Medir la intensidad de emisión del blanco. Contruir la recta del calibrado representando la intensidad de luminiscencia en el máximo de emisión, para los estándares una vez sustraído el blaco, en función de la concentración de quinina. Ajustar elcalibrado a una recta mediante el método de mínimos cuadrados.
4- Pipetear 0,5 mL de la muestra, previamente desgasificada en un baño de ultrasonidos, en un matraz aforado de 50mL y enrasando con acido sulfúrico 0,05M. Preparar 5 replicas. Medir la intensidad de fluorescencia de la muestra, sustraer el blanco y callcular la concentración de quinina para la misma a partir del calibrado.
5- Paradeterminar el limite de detección y el de cuantificación medimos la emisión de 10 disoluciones del blanco.
RESULTADOS
Calibrado
Patrón de quinina, mg/L
Intensidad de fluorescencia (a.u)
λex = 343nm
λem =453nm
0,2
111,89
0,4
219,15
0,6
335,87
0,8
459,56
1
532,47
Muestra

1
484,72
2
461,68
3
457,74
4
421,84
5
443,83

1.- Representar la recta de calibrado y obtener suecuación.

Como podemos observar el valor de r2 no es muy bueno (0.994) Pero supongo que es por una desviacion en la muestra de 1ppm por ser de alta concentracion. Sin embargo al ser una desviacion pequeña no despresiamos el punto.
2.- Calcular la concentración de quinina presente en la muestra de agua tónica.
La concentración será de 82,5 ppm para la quinina en la tónica.
(Los cálculos sepueden ver en el anexo)
3.- Calcular el intervalo de confianza y la precisión.
Intervalo de confianza al 95%: t(4, 0.975)=2,776

Precisión:
Desviación estándar:

Desviación estándar relativa:

Coeficiente de variación


Al tener un coeficiente de variación pequeño podemos deducir que el error es pequeño y por lo tanto los datos son fiables.
Varianza:


4.- Calcular el límite dedetección.

K=3 b= 547,8
El límite de detección mide la cantidad más pequeña que se puede detectar con un cierto nivel de confianza.

K=10 b=547,8
El límite de cuantificación nos da la concentración más pequeña que se puede cuantificación una precisión dada.
DISCUSION DE RESULTADOS
A través del estudio estadístico de los datos podemos concluir que los datos son fiables. Si bien nos...