Determinación Semicuantitativa De Antígeno Prostático
Páginas: 3 (522 palabras)
Publicado: 2 de octubre de 2011
Determinación semicuantitativa de antígeno prostático
FUNDAMENTO:
La lactato deshidrogenasa (LDH) cataliza la reducción del Piruvato por el NADH, según la siguiente reacción:
Piruvato + NADH+ Hᶧ LDH L-lactato+ NADᶧ
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de LDH en lamuestra ensayada.
SIGNIFICADO CLINICO:
El LDH es una enzima que se encuentra en muchos tejidos del cuerpo, pero es mayor su presencia en el corazón, hígado, riñones, músculos, glóbulos rojos,en el cerebro y en los pulmones.
Su función es interconvertir el Piruvato y el lactato. En el ejercicio muscular las células musculares transforman la glucosa en lactato, el lactato se libera a lasangre, y puede ser recogido por el hígado que lo vuelve a transformar en glucosa que se derrama a la sangre para que pueda volverse a utilizar como energía por los tejidos.
La LDH tiene un granvariedad de isoenzimas con leves diferencias en su estructura, que sugieren diferentes orígenes por cada tejido (LDH1 del corazón, LDH2 del sistema retículo endotelial, la LDH3 de los pulmones, la LDH4 delos riñones, la LDH5 del hígado y músculo).
La LDH2 en personas normales es el mayor constituyente del LDH total.
REACTIVOS:
R 1Tampón | Fosfato pH 7,8……. 50 mmol/LPiruvato…………….0,6 mmol/L |R 2Substrato | NADH ……………….0,18 |
MATERIAL ADICIONAL
-Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
-Baño termostable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (±0,1ºC)
-Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.-Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRA:
Suero Separado lo antes posible de los hematíes. No usar oxalatos como anticoagulantes ya que interfieren en los resultados. No usar muestrashemolizadas. Estabilidad: 2 días a 2-8ºC
PROCEDIMIENTO
1.-Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . ....
FUNDAMENTO:
La lactato deshidrogenasa (LDH) cataliza la reducción del Piruvato por el NADH, según la siguiente reacción:
Piruvato + NADH+ Hᶧ LDH L-lactato+ NADᶧ
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de LDH en lamuestra ensayada.
SIGNIFICADO CLINICO:
El LDH es una enzima que se encuentra en muchos tejidos del cuerpo, pero es mayor su presencia en el corazón, hígado, riñones, músculos, glóbulos rojos,en el cerebro y en los pulmones.
Su función es interconvertir el Piruvato y el lactato. En el ejercicio muscular las células musculares transforman la glucosa en lactato, el lactato se libera a lasangre, y puede ser recogido por el hígado que lo vuelve a transformar en glucosa que se derrama a la sangre para que pueda volverse a utilizar como energía por los tejidos.
La LDH tiene un granvariedad de isoenzimas con leves diferencias en su estructura, que sugieren diferentes orígenes por cada tejido (LDH1 del corazón, LDH2 del sistema retículo endotelial, la LDH3 de los pulmones, la LDH4 delos riñones, la LDH5 del hígado y músculo).
La LDH2 en personas normales es el mayor constituyente del LDH total.
REACTIVOS:
R 1Tampón | Fosfato pH 7,8……. 50 mmol/LPiruvato…………….0,6 mmol/L |R 2Substrato | NADH ……………….0,18 |
MATERIAL ADICIONAL
-Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
-Baño termostable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (±0,1ºC)
-Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.-Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRA:
Suero Separado lo antes posible de los hematíes. No usar oxalatos como anticoagulantes ya que interfieren en los resultados. No usar muestrashemolizadas. Estabilidad: 2 días a 2-8ºC
PROCEDIMIENTO
1.-Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . ....
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