determinacion de Actividad Useasica

6.1 Preparación de material y observaciones
Utilizar material analítico común
Realizar siempre muestra y estándar por duplicado.


6.2 Instrumental
Cromatógrafo Líquido, Detector UV-Vis,inyector manual, marca Shimadzu.
Columna: Tipo USP L1


6.3 Condiciones cromatográficas
Columna: LiChrospher-100, RP18, 250-4mm (Tipo USP L1); o equivalente
Flujo: 1,2 ml/min
Fase móvil: FM 052Longitud de onda: 280 nm
Volumen de inyección: 20 µl
Temperatura de columna: 35 °C

6.4 Reactivos
Agua bideionizada
Agua, calidad HPLC
Metanol, calidad HPLC
Metanol, calidad p.a.
NaOH 1NSulfato de tetrabutilamonio, calidad p.a.


6.5 Conservación de la muestra
Se mantiene cerrada hasta el momento del análisis.


6.6 Preparación de la fase móvil (FM 052)
a) Preparación para 1litro:
1. Pesar 0,6 g de sulfato de tetrabutilamonio
2. Disolver en agua HPLC
3. Completar la solución anterior con agua HPLC hasta un peso total de 300 g
4. Agregar a la solución anterior 553 g demetanol HPLC
5. Filtrar por membrana de 0,45 micrones
b) Esta mezcla corresponde a la relación de volumen buffer:metanol 30:70
c) Identificar la mezcla
d) Estable al menos 2 años a temperaturaambiente


6.7 Preparación de la muestra
Muestras en polvo al 4%
a) Preparar por duplicado
b) Solución A:
1. En un matraz seco de 200 ml, pesar 2,6 g de muestra
2. Agregar con pipeta aforada 100 mlde metanol
3. Agregar con pipeta aforada 4 ml de NaOH 1N
4. Agitar en agitador magnético durante 10 minutos
5. Colocar en baño ultrasónico durante 15 minutos agitando de vez en cuando
c) Soluciónde trabajo

2 ml Sol A + 70 ml metanol ----- a 100 ml con agua bideionizada

d) No filtrar la solución obtenida. De ser necesario, centrifugarla


Muestras de materia prima
Se prepara dela misma manera que el estándar.



6.8 Preparación del estándar
a) Preparar por duplicado
b) Solución 1:
50 mg de Feben droga patrón + 1 ml NaOH 1N ---- a 50 ml con metanol
(colocar en...