Determinacion De Azucares Reductores

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA SEDE MEDELLÍN
FACULTAD DE MINAS. ESCUELA DE PROCESOS Y ENERGÍA
INGENIERIA BIOQUIMICA
PRÁCTICAS DE LABORATORIO. Adriana Ruiz Co.

DETERMINACIÓN AZÚCARESREDUCTORES POR EL MÉTODO DEL Ácido 3,5 Dinitro salicílico (DNS)

1. Objetivo:



Determinar los azucares reductores de una muestra.

2. Marco teórico

El ácido 3,5-dinitrosalicilico sereduce al ácido 3-amino-5-nitro salicílico mientras los grupos aldehídos se oxidan a grupos carboxilos. La principal ventaja de este ácido en la determinación de azucares reductores, se encuentranen la gran conveniencia que tiene comparada con la mayoría de las otras pruebas para azucares, en las cuales generalmente se deben realizar un gran numero de pruebas.

3. Equipos:

• Tubos deensayo
• Plancha de calentamiento con agitación
• Pipetas volumétricas (1,5,10 ml)
• Balones volumétricos (25,10 ml)
• Balanza analítica ( cuatro cifras decimales)
•Espectrofotómetro UV-VIS

4. Reactivos:

• ácido 3,5-dinitrosalicilico
• tartarato de sodio y potasio
• hidróxido de sodio
• glucosa anhidra pura
• agua destilada.

5.preparación de soluciones

Pasos para preparar DNS:


➢ Disolver 1.6 g de NaOH en H2O destilada.
➢ Adicionar 30 g de tartrato de Na y K
➢ Adicionar 1 g de DNS
➢ Aforar a 100ml con H2O destilada
➢ Almacenar en frascos ámbar a 4 ºC


Preparar 50 ml y distribuirlos en tubos de ensayo de 10 ml, almacenar a 4ºC


Stock de glucosa 4 mg/ml:|Concentración (g/l) |0.2 |0.4 |0.6 |0.8 |1 |1.2 |
|Glucosa ml stock |0.025 |0.05 |0.075 |0.1 |0.125 |0.15 |
|H2Odestilada mL |0.475 |0.450 |0.425 |0.4 |0.375 |0.35 |
|Volumen total |0.5 |0.5 |0.5 |0.5 |0.5 |0.5 |...