determinacion de carbohidratos totales


4.4. Carbohidratos Totales Disponibles (Clegg-Anthrone).
Este método determina la cantidad de carbohidratos totales, basándose en su contenido de almidones hidrolizables y azúcares solubles.Reactivos
Solución de ácido perclórico al 52 %. 279ml de ácido perclorico (grado específico 1.70) en 100 ml de agua destilada; deje enfriar antes de usar.
Solución de ácido sulfúrico. 760ml deH2SO4 (grado específico 1.84) en 330ml de agua destilada; deje enfriar antes de usar.
Reactivo Anthrone. Prepare suficiente reactivo Anthrone preparando una solución de ácido sulfúrico al 0.1 % con el fin deusarla el mismo día.
Solución estándar de glucosa. Disuelva 100mg de glucosa en 100ml de agua.
Solución estándar de glucosa diluida. Diluya 10ml del estándar de glucosa a 100 ml de agua destilada(1ml = 0.1mg de glucosa).
Materiales y Equipo
Espectrofotómetro.
Papel filtro Wathman no. 542 o Schleicher y Schill no. 150.
Procedimiento
Extracción:
1. Pese con aproximación de 0.001g 1.0g demuestra seca ó 2.5g de muestra húmeda conteniendo aproximadamente de 60 a 300 mg de carbohidratos totales disponibles.
2. Transfiera cuantitativamente a una probeta graduada de 100 ml con tapón.
3.Adicione 10 ml de agua y agite con una varilla de vidrio para dispersar la muestra.
4. Adicione 13 ml de la solución de ácido perclórico. Agite constantemente con la varilla de vidrio durante 20minutos.
5. Enjuague la varilla con agua destilada y lleve el volumen a 100 ml. Mezcle y filtre a un matraz volumétrico de 250 ml.
6. Enjuague la probeta graduada con agua destilada y adicione al matrazvolumétrico. Afore el matraz con agua destilada y agite.
Determinación:
1. Diluya 10 ml del extracto a 100 ml con agua destilada. Con una pipeta pase a un tubo de ensaye 1 ml del filtrado diluido.2. Tome con la pipeta dos muestras de 1 ml de agua destilada que servirán como blancos por duplicado y coloque cada uno de ellos en un tubo de ensaye.
3. Tome dos blancos duplicados de 1 ml usando...