DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS

Práctica No. 1
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
OBJETIVO: Mediante el poder reductor de los azucares, observar monosacáridos, disacáridos y polisacáridos
FUNDAMENTO:
Los carbohidratos son los compuestos orgánicos más abundantes de la
Biosfera. La mayoría pueden ser representados con la fórmula general Cx (H2O) y por lo que son literalmente, hidratos de carbono se definen comopolihidroxialdehídos o polihidroxiacetonas cíclicas o sustancias que luego de hidrolizarse dan origen a los mismos. Un carbohidrato que no puede ser hidrolizado en uno más simple es llamado monosacárido. Los monosacáridos más comunes son la glucosa, la fructosa, la galactosa y la manosa. Un carbohidrato que puede ser hidrolizado en dos moléculas de monosacáridos es llamado disacárido. La determinación deglucosa es de importancia médica ya que niveles sanguíneos alterados pueden ser signo de una enfermedad metabólica común conocida como diabetes mellitus.


MATERIALES
8 tubos de ensaye                                  1 gradilla
1 mechero                                             1 vaso de precipitado de 50 ml
1 Tripié con tela de asbesto                  4 vasos de pp de 100 ml
1agitador                                              6 pipetas
2 pinzas para tubo de ensaye               1 baño maría
Etiquetas
REACTIVOS:
Solución de glucosa al 5%                 Solución de sacarosa al 5%
Solución de fructuosa al 5%              Solución de almidón al 5%
Solución de Fehling A                       Solución de Fehling B
Solución de Lugol                             Soluciónalcalina (sosa, potasa, bicarbonato),

REACTIVO DE FEHLING A:      Diluir 34.64 gr de sulfato de cobre cristalizado en 500 cc. De agua destilada.

TÉCNICA
A.- REACCION DE FEHLING 
1.- Utilice 4 tubos de ensayo limpios.
2.- Al tubo 1 añada 2 ml de solución glucosada al 5%
3.- Al tubo 2 añada 2 ml de solución de sacarosa al 5%
4.- Al tubo 3 añada 2 ml de solución de fructuosa al 5%
5.- Altubo 4 añada 2 ml de solución de almidón al 5%
6.- Mezcle a partes iguales las soluciones Fehling A y Fehling B.
7- Coloque en cada uno de los cuatro tubos de ensaye 3 ml de la mezcla anterior (si no hizo una mezcla previa, añada 1.5 ml de cada solución Fehling
8.- Calentar los tubos a la llama del mechero hasta que hiervan.
La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo yserá negativa si queda azul o cambia a un tono azul-verdoso.

B.- REACCIÓN DEL LUGOL:
1.- Utilice 4 tubos de ensayo limpios.
2.- Al tubo 5 añada 2 ml de solución glucosada al 5%
3.- Al tubo 6 añada 2 ml de solución de sacarosa al 5%
4.- Al tubo 7 añada 2 ml de solución de fructuosa al 5%
5.- Al tubo 8 añada 2 ml de solución de almidón al 5%
6.- Añadir 5 gotas de Lugol en cada tubo de ensaye.7.- Observar y anotar los resultados.
8.- Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
9.- Enfriar el tubo de ensayo al grifo y observar cómo, a los 2-3 minutos, reaparece el color azul.
Si la disolución del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reacción es positiva. 

OBSERVACIONES:

Observar y anotar los resultados de los diferentes grupos deprácticas con las distintas muestras

Glúcido
Glucosa
Sacarosa
Fructosa
Almidón
Reacción con Fehling
Café oscuro
Rojo Oscuro
Marrón/Naranja
Morado/Azul
Reacción con   Lugol
Amarillo cristalino
Amarillo pálido
amarillo
Rosa claro

 



CUESTIONARIO:

1.- ¿Qué cambios suceden a un hidrato de carbono cuando se disuelve en una solución alcalina?
Todos los monosacáridos y losdisacáridos con enlace monocarbonilo, cuando se encuentran en solución a pH alcalino, tienen la capacidad de reducir otros compuestos. Esta capacidad reside en las características del grupo carbonilo (C anomérico en formas cicladas) libre. Esta propiedad, y por tanto, la presencia de un azúcar reductor, se ponen de manifiesto mediante la reacción de FEHLING.
 El reactivo de Fehling consta de:...