Determinacion de clostrdium

RECUENTO DE ESPORAS CLOSTRIDIUM SULFITO REDUCTOR

Este análisis es considerado como el recuento indicador más importante de las bacterias anaerobias espóroformadoras. Varias especies del géneroClostridium tienen la propiedad de reducir el ión sulfito a sulfuro, que en presencia de citrato férrico u otra sal de metales pesados dan colonias negras.

Equipo y material

* Lo necesariopara la preparación y dilución de los homogenizados de alimentos
* Incubadora a 35ºC +/-2ºC
* Baño de agua a 45-50ºC
* Refrigerador a 0-5ºCCampanas de anaerobiosis
* Pipetas de 1 mlestériles
* Gradillas
* Portaobjetos
* Microscopio
* Tubos tapa rosca de 150 x 15 mm estériles

Medios de cultivo y reactivos

* Agar sulfito polimixina sulfadiazina, SPSProcedimiento

1. Preparar la muestra y las diluciones de los homogenizados tal como se ha recomendado
2. Pipetear 1 ml de cada una de las diluciones en tubos estériles
3. Calentar los tubos concada una de las diluciones, a 80ºC por 10 minutos. Enfriar rápidamente en agua corriente
4. Adicionar 10-12 ml de Agar SPS Dejar solidificar
5. Adicionar una segunda capa de medio. Dejarsolidificar
6. Incubar a 35ºC +/-2ºC por 72horas
7. Observar diariamente los tubos, debido a la producción de color negro por la formación de H2S que puede invadir el medio siendo difícil sulectura

RECUENTO DE BACILLUS CEREUS

Bacillus cereus es un microorganismo aerobio, Gram positivo, esporulado, común en el suelo, vegetales, alimentos crudos y procesados. Cuando se encuentra unnúmero alto, mayor de 106 colonias/g, en un alimento puede ocasionar intoxicación alimentaria.

Equipo y material

* Lo necesario para la preparación y dilución de los homogenizados de alimentos* Incubadora a 35ºC +/-2ºC
* Baño de agua a 45 – 50ºC
* Refrigerador a 0-5ºC
* Cajas de petri estériles
* Pipetas de 1 ml estériles
* Varillas de vidrio de hockey
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