Determinacion De Colesterol
OBJETIVO: El alumno aquirir la habilidad y destreza de realizar esta técnica manual de acuerdo con las instrucciones del reactivo.
FUNDAMENTO:
La sangre debe sercolectada seguida de 12 horas de ayuno.
La muestra puede ser suero o plasma colectados con EDTA como anticoagulante. EVITAR HEMOLISIS.
INTRODUCCION: el método enzimático para colesterol fueintroducido en 1973 por flegg y kiehmord utilizado colesterol oxidasa de origen bacteriano, seguido saponificación química de los esteres del colecterol.Ries chlu modifico esta técnica y allan Cd publicaronlos primeros ensayos enzimáticos completos, combinando colecterol libre y grasos
El colecterol para day Colect-4-3-ana y oxidan en presencia del colecterol oxidasa en presencia del colesteroloxidasa un cromógeno quinonaumina,con absorción máxima de 500 nm, se produce cuando los fenos se acopia. Oxidativamente con 4 amino fenozona en presencia de peroxidasas con peróxido de hidrogeno
Laintensidad del color rojo final se proporciona a la concentración total de colesterol
Esteres colecterol CE colecterol + Acidos Grasos
Colecterol + COxcolect-4-en-ona+ H2O2
H2O2 + 4 aminofenzinona + PHB S POD 2H2O + O- quinoenzima
El reactivo de preparación de stanbio colorido delipoproteínas de standio colorido lipoproteínas de alta denidad (HDC) debe adquirir por separado
MATERIAL | CAPACIDAD | CAPACIDAD |
cubetas | | |
Equipo
Espectofotometro
REACTIVO:
Estalisto para usarse
PROCEDIMIENTO:
Pipetee en las cubetas las sig. Volúmenes (ml) y mezcle bien
| REACTIVO BLANCO | ESTANDAR(s) | MUESTRA(u) |
REACTIVO | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
ESTANDAR | --- |0.01 | -- |
MUESTRA | --- | --- | 0.01 |
Incube todas las cubetas a 37°C por 5 min o por 10 min a temperatura ambiente
Lea S y U contra RB a 500nm antes de 60 min
Calcular los valores...
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