Determinacion de creatinina


1. INTRODUCCION
La creatinina proviene de la creatina, una molécula muy importante para la producción de energía músculo esquelético y que cumple un rol fundamental en el metabolismo energético, como sustrato (en la forma de fosfocreatina) para la formación de ATP. El requerimiento diario es de 2g, de los cuales 1g se incorpora a la dieta a través del consumo de carnes y pescado, y el restose sintetiza en el hígado, páncreas y riñones, a partir de aminoácidos precursores.
2. MATERIALES
Sangre
Tubos de boro silicato
Pipetas de y 2 mL.
Micropipeta
Agua destilada
Balanza
Macro Centrifuga
Reactivo de creatinina
Espectrofotómetro
Tips
Pinza
Gradilla
Gotero

3. PROCEDIMIENTO
Preparar 11 tubos con la numeración correspondiente: blanco 1, estándar 1, agua 3, muestras 3 yreactivos 3.
Una vez que saco la sangre de los pacientes, se procede a colocar en los tubos de boro silicato, en el cual se procederá a esperar a que la sangre coagule.
Una vez que haya coagulado se procederá a pesar las muestras, una vez pesadas estas se procede a tomar otros tubos de boro silicato e insertar el agua en ellos y pesarlos.
Una vez obtenido el mismo peso que anteriormente seobtuvo en las muestras de sangre, se procederá a colocarlas en la centrifuga, de esquina a esquina, o sea lateralmente.
La centrifuga será programada a 5 minutos a 2500 revoluciones.
Trascurrido los 5 minutos la centrifuga se apagara automáticamente, y se observara que los sueros se separaron de la sangre.
Se pipetean 3 volúmenes diferentes; con la pipeta de 2 ml se pipetea 1 ml del reactivo dela creatinina y se procederá a ponerlos en otros tubos de boro cilicato.
Con la micro pipeta se procederá a pipetear 100 microlitros de los sueros para mezclar con las tres muestras del reactivo de creatinina (se deberá limpiar el tubo), una vez que la muestra llega a hacer contacto con el reactivo, se lo agita y se procederá a llevarlo a la lectura en el espectrofotómetro.
La lectura serealizará en un lapso de 1.5 minutos
luego realiza la lectura de la muestra y se procederá a sacar los resultados por la absovancia y la transmitancia.


4. RESULTADOS

Creatinina:


CONCENTRACIÓN St
ABSORBANCIA
MUESTRA #1
0,023
1,0 mg/dl
MUESTRA #2
0,029
1,3 mg/dl
MUESTRA #3
0.022
0,9 mg/dl

Valores de referencia: 0,6 – 1,4 mg/dl.

Fundamento químico de la creatinina
Esteprocedimiento está basado en una modificación de la reacción original del picrato (Jaffe). La creatinina en condiciones de alcalinidad reacciona con los iones picrato con formación de un complejo de un cromógeno. La velocidad de formación del complejo medido a través del aumento de la absorbancia en un intervalo de tiempo prefijado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.Creatinina + Acido pícrico pH >12 Complejo de un cromógeno
37ºC
Especificaciones analíticas para Creatinina
Principio de Reacción
Cinético
Temperatura
37 °C
Tipo de Reacción
Punto Final
Dirección de Reacción
Positiva
Longitud de onda primario
510 nm
Tiempo de lectura
1 min. 30seg.
Linealidad
20 mg.


5. CONCLUSIONES
A modo de conclusión se debe manifestar sobre la formación de creatinina, es constante transformándose cada 24 horas una cantidad aproximada de un 2% de creatina en creatinina es un compuesto orgánico generado a partir de la degradación de la creatina, que es un nutriente útil para los músculos.
Es un producto de desecho del metabolismo normal de losmúsculos que usualmente es producida por el cuerpo en una tasa muy constante, dependiendo de la masa de los músculos, y normalmente filtrada por los riñones y excretada en la orina. La medición de la creatinina es la manera más simple de monitorear la función de los riñones.

6. INVESTIGACIÓN

Creatinina
La creatinina es una molécula de deshecho que se genera a partir del metabolismo...