Determinacion De Esterilidad

1. OBJETIVO:
1.1. Establecer un procedimiento para valorar la ausencia o presencia de microorganismos viables utilizando medios de cultivo adecuados.

2. ALCANCE:
2.1. Este procedimiento es aplicable al área analítica del departamento de control de calidad.

3. FRECUENCIA:
3.1. Este procedimiento se deberá utilizar cada vez que se realice un lote de productos o cuando se requieracorroborar la esterilidad de los productos en retención.

4. DEFINICIONES:
4.1. Esterilidad. Ausencia de todo microrganismo capaz de multiplicarse.
4.2. Producto estéril. Es aquel que esta libre de todo microrganismo viable.

5. RESPONSABILIDADES:
5.1. Es responsabilidad del jefe de control de calidad dar a conocer el presente procedimiento y supervisar el cumplimiento del mismo.
5.2. Esresponsabilidad del departamento de producción proveer al departamento de calidad, las muestras requeridas para la prueba.
5.3. Es responsabilidad del Departamento de Calidad, llevar a cabo el siguiente procedimiento.
5.4. El Responsable Sanitario debe verificar que el procedimiento se lleve a cabo en las condiciones adecuadas.
5.5. Es responsabilidad del personal del área de control de calidadcumplir con lo establecido en este procedimiento.

6. DESARROLLO:
6.1. Determine la cantidad de muestras por lote a analizar de acuerdo a la tabla No. 1 de la sección de anexos.
6.2. Condiciones ambientales
6.2.1. Llevar a cabo la prueba en condiciones asépticas usando la campana de flujo laminar, en cuarto limpio perfectamente libre de microorganismos de acuerdo a lo establecido al PNO-COC-027.Limpieza en áreas de control de calidad.
6.2.2. Monitoreé regularmente las condiciones de trabajo en las cuales se realiza la prueba.

6.3. Preparación de medios de cultivo
6.3.1. Preparar el medio fluido de tioglicolato y caldo soya tripticaseína, a partir de ingredientes o de formulaciones deshidratadas siguiendo las instrucciones del fabricante. Puede utilizar también medios de cultivolistos para su uso que puede adquir comercialmente. Vea el PNO-COC-.030. Preparación de medios de cultivo.
6.3.2. Esterilizar en autoclave, ajustar el pH con soluciones de NaOH y HCl 1.0N, hasta obtener un pH de 7.1 ± 0.2 para medio fluido de tioglicolato y un pH de 7.3 ± 0.2 para caldo soya tripticaseina.
6.4. Inoculación de la muestra
6.4.1. Determine la cantidad de muestra a utilizar de acuerdoa la tabla No. 2 de la sección de anexos.
6.4.2. Transferir la cantidad de la muestra a ser analizada directamente en el medio de cultivo, de tal forma que el volumen de la muestra no sea mayor del 10% del volumen del medio de cultivo.
6.4.3. Transferir la cantidad de la muestra a ser analizada directamente en 200 mL del medio fluido de tioglicolato y similarmente transferir la misma cantidadal caldo soya tripticaseína.
6.4.4. Exponer un frasco de medio de cultivo a las condiciones de operación de la campana donde realiza la inoculación. Registre este como su control de medio ambiente.
6.4.5. Inocule un frasco del caldo soya tripticaseina con no mas de 100 UFC de la cepa Candida albicans. Registrar este como control positivo para este medio.
6.4.6. Inocule un frasco del caldo soyatripticaseina con no más de 100 UFC de la cepa Pseudomonas auruginosa. Registrar este como control negativo para este medio.
6.4.7. Inocule un frasco del medio fluido de tioglicolato con no mas de 100 UFC de la cepa Staphylococcus aureus. Registrar este como control positivo para este medio
6.4.8. Inocule un frasco del medio fluido de tioglicolato con no mas de 100 UFC de la cepa Escherichiacoli. Registrar este como control negativo para este medio.
6.4.9. Incubar un frasco de medio de cultivo sin abrir. Registrar este como control de medio de cultivo.
6.4.10. Incubar el medio fluido de tioglicolato a 32.5ºC ± 2.5º C y el caldo soya tripticaseína a 22.5 ºC ± 2.5 ºC Por no menos de 14 días.
6.4.11. Cuando el material de prueba enturbia el medio y la presencia o ausencia de...