Determinacion de glicemia en ayunas

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
UNIVERSIDAD DEL PERÚ, DECANA DE AMÉRICA
FACULTAD DE MEDICINA
E.A.P TECNOLOGÍA MÉDICA
LABORATORIO CÍNICO Y ANATOMIA PATOLÓGICA

TEMA:
DETERMINACIÓN GLICEMIA EN AYUNAS Y POST ABSORTIVO
MÉTODO QUÍMICO – MÉTODO ENZIMÁTICO
PROFESOR:
Mg. TM HELI BARRÓN PASTOR
CURSO:
BIOQUÍMICA
INTEGRANTES:
* ROCA BEJAR,ANEL
* RUEDA TORRES LENIN
* ROJASBARRENECHEA,JOEL
* YAURI CONDOR, KATHERINE
AÑO:
2011

INTRODUCCIÓN

El carbohidrato mas importante en bioquímica de los mamíferos es la glucosa, ya que casi todos os carbohidratos de los alimentos son convertidos en glucosa. La glucosa sanguínea es regulada por la acción de las células pancreáticas a través de la insulina y glucagon. La glicolisis, además de ser la ruta principal delmetabolismo de la glucosa para producir AcetilCoA, es la ruta importante para metabolizar fructosa y galactosa que provienen de la dieta. La glicolisis se pude dar tanto en condiciones aerobias como en anaerobias. En la presente practica haremos la determinación de la glucosa sanguínea obtenida de animales de experimentación en ayunas y en estado postprandial, para lo cual se empleara el métodoquímico Folin –Wu y el método enzimático GOD POD (Glucosa oxidasa peroxidasa).

OBJETIVOS

La presente práctica tiene como objetivos lo siguiente

1. Determinar glucosa sanguínea por método químico y método enzimático.

2. Comparar ambos métodos estableciendo similitudes y diferencias

3. Evaluar la determinación de glicemia, en ayunas y en estado postprandial.

MARCO TEÓRICOMATERIALES:
* Pipetas
* Tubos de ensayo
* Propipeta
* Gradilla
* Espectrofotómetro

REACTIVOS
* Suero
* Reactivo cupro alcalino
* Reactivo fosfomolibdico
* H2SO4 2/3 N
* Estándar de glucosa 10 mg%


PROCEDIMIENTOS

Se prepara 4 animales de experimentación de acuerdo a las indicaciones del profesor.
La toma de muestra se realiza el día de la práctica.Previa anestesia, se tomara la muestra sanguínea por punción cardiaca, usando jeringa heparinizada. Por tanto, se obtendrán:
2 muestras en estado post absortivo.
2 muestras en ayunas
DETERMINACIÓN DE GLUCOSA (FOLIN-WU)
Este método requiere un paso previo de desproteinización
En un tubo para centrifugar, añadir 3,5 ml de H2O destilada,0,5 ml de muestra (suero),0,5 ml de reactivodesproteinizante (H2SO4 2/3 N ) mezclar bien y agregar 0,5 ml de tungstato de sodio 10%, agitar bien, dejar reposar por 3 minutos y centrifugar a 3500 rpm por 5 minutos. Trabajar con el sobrenadante.
Prepare la siguiente batería de tubos.
TUBOS | BLANCO | ST | MP |
ml sobrenadante | | | 0, |
ml estándar de glucosa 10 mg% | | 0,5 | |
ml agua destilada | 0,5 | | |
ml reactivo cuprico-alcalino| 0,5 | 0,5 | 0,5 |
Deje en baño | María hirviente por | 10 minutos, enfriar | |
ml reactivo fosfomolibdico | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
ml agua | 4 | 4 | 4 |

Haga la lectura en filtro verde. Y determine la concentración de glucosa.

DETERMINACION DE GLUCOSA METODO ENZIMÁTICO
Previa a la determinación. Hacer la siguiente dilución del suero, medir en un tubo de ensayo 0.2 ml de suero y agregar4.8 ml de agua destilada, homogenizar bien.
Preparar la siguiente batería de tubos
El estándar (St) y muestra problema

TUBO | MP | ST |
ml suero diluido | 0.2 | -------- |
ml estándar de glucosa 10 mg/dl | -------- | 0.2 |
ml reactivo de trabajo | 2.0 | 2.0 |

Incubar en baño María 37`c durante 5 minutos.
Mezclar bien la solución.
Leer las absorbancias de los tubos a 505.0 nm.Encontrar la concentración de glucosa (en mg/dl) en la muestra de suero.




RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Determinación por Folin-wu

Muestra problema de el animal en ayunas.

| BLANCO | St | MP |
ABS | 0.005 | 0.075 | 0.101 |


Entonces de acuerdo a la formula
MP=StxABS(MP-B)xFdABS(St-B) Fd=11
MP=150.86mg%

Determinación por método enzimático
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