Determinacion de la accion de una proteasa

DETERMINACION DE LA ACCION DE UNA PROTEASA

INTRODUCCION
Las proteasas o también llamadas peptidasas son enzimas que rompen los enlaces peptídicos de las proteínas. Usan una molécula de aguapara hacerlo y por lo tanto se clasifican como hidrolasas.
Se encuentran naturalmente en organismos vivos, donde se usan para la digestión molecular y la reducción de proteínas no deseadas. Laspeptidasas pueden romper ya sea enlaces peptídicos específicos (Proteólisis limitada), dependiendo en la secuencia de aminoácidos de la proteína, o pueden reducir un péptido completo a aminoácidos.(Proteólisis ilimitada).
La función de las peptidasas es inhibida por enzimas inhibidoras de proteasas. Los inhibidores de proteasas naturales no se deben confundir con los inhibidores de proteasas usados enla terapia anti-retroviral. Algunos virus, incluyendo al VIH, dependen de las proteasas en sus ciclos reproductivos, es por eso que los inhibidores de proteasas se desarrollan como métodosantivirales. Como las peptidasas son en si mismas péptidos, es natural preguntarse si las peptidasas se pueden degradar. Es un hecho conocido que muchas peptidasas se desdoblan a si mismas. Esto puede ser unmétodo importante de regulación de la actividad de las peptidasas.
EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS
Baño maría
Refrigeradora
Balanza
Papaya, piña, gelatina
Gasa / algodón o pañuelo
Cuchillo
Tubos deensayo
Morteros
Pipetas de 5ml
Embudos
Vasos de precipitación de 250ml
Agua destilada.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Pesamos 36g. de gelatina en 180ml de agua caliente, lo dejamos enfriar en 18vasitos de plástico.
Trituramos las partes de las frutas (papaya y piña) en un mortero.
Filtramos cada muestra triturada a sus respectivos vasos.
ACCIÓN DE LA BROMELINAS EN LA GELATINA

PIÑACASCARA
PULPA
CORAZÓN
TUBOS O VASOS
I
II
III
IV
V
VI
VII
VII
IX
3ml filtrados c/u
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Baño maría por 20 min en vaso precipitado 37°C
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Baño...