Determinacion De Nitritos

DETERMINACIÓN DE NITRITOS
Los nitritos representan una forma intermedia en el ciclo del nitrógeno; pueden estar presentes en
las aguas como resultado de la degradación biológica de las proteínas o provenir de otras fuentes.
La mayoría de los métodos para la evaluación de iones nitrito se basan en la clásica reacción de
Griess (1879) modificada por Llosvay (1889), mediante la cual se convierteácido nitroso en una
tintura fuertemente coloreada, empleando una amina aromática primaria para diazotar el ion nitrito,
acoplando posteriormente el ion diazo resultante con otra amina aromática en una reacción que
lleva a la formación de un compuesto azo rosado, cuya absorbancia es proporcional a la cantidad de
nitrito inicialmente presente.
Las combinaciones de aminas que resultan encompuestos azo con absorbancias suficientemente
altas para permitir su aplicación en el análisis de las cantidades traza en que se encuentra
normalmente el nitrito en el agua de mar, son muy pocas. Los procedimientos empleados
inicialmente consistían en modificaciones de Griess-Llosvay, donde se utilizaba ácido sulfanílico
para la diazotación y la 1-naftilamina para el acoplamiento. La másapropiada de estas
modificaciones es la indicada por Barnes (1959), que se basa en el procedimiento desarrollado por
Rider & Mellon (1946).
El uso de la anterior combinación de reactivos ha sido desechado para evitar el riesgo de trabajar
con la potencialmente carcinógena 1-naftilamina por haberse encontrado el método de la
sulfanilamida y diclorohidrato de N-(1-naftil)-etilendiamina que da mejoresresultados. Este método
fue desarrollado por Shinn (1941) y modificado por Bendschneider y Robinson (1952); actualmente
es el de mayor aceptación por la comunidad de laboratorios oceanográficos. En principio el nitrito
NO2 -es determinado a través de la formación de un compuesto azo rojo producido a un pH de 2 a
2.5, acoplando sulfanilamida diazotizada con N-(1-naftil) etilendiamina dicloruro(NED dicloruro).
La absorbancia de la solución es medida a 543 nm para su posterior cuantificación.
Alcance y aplicación
El método es aplicable a todo tipo de aguas, especialmente de mar, pero puede presentar problemas
con aguas coloreadas. La reacción colorimétrica es específica para iones nitrito, sin embargo,
pueden causar interferencias los iones Cu2+ en concentraciones mayores de 0.5 mg/ly los iones
sulfuro en concentraciones superiores a 60 µg de S /l. La mínima cantidad de nitrito detectable por
este método, usando celda de 10 cm es de 0.01 µg.at.NNO-2/l.
=

Toma de muestra, almacenamiento y preservación
Colectar en frascos de plástico o vidrio, congelar si no se realizará el análisis inmediato, almacenar
por un máximo de 28 días.
Materiales y equipos
EspectrofotómetroVIS, con rango espectral de 400-900 nm
Celdas de 10 ó 1 cm de paso óptico
Viales de 40 ml
Dosificadores o pipetas de 1 ml
Pipetas aforadas de 25, 10, 5, 2 y 1 ml
Probetas de 100 y 50 ml
Matraces aforadas de diferentes capacidades
Reactivos
Solución de sulfanilamida (C6H8N2O2S): Disolver 2.5 g de sulfanilamida R.A. en 25 ml de ácido
clorhídrico concentrado y añadir 150 ml de aguadestilada, mezclar y completar a 250 ml, guardar
en un frasco ámbar. Esta solución es estable por varias semanas en oscuridad.

Solución de diclorhidrato de N-(1-naftil)etilendiamina
(C12H16Cl2N2): Disolver 0.5 g de reactivo puro en agua destilada y completar a 500 ml, almacenar
en un frasco ámbar. La solución es estable por un mes. Debe renovarse cuando desarrolle
una coloración café.
Estándar denitrito: Disolver 0.0690 g de nitrito
de sodio (NaNO2) previamente seco a 105°C por dos horas en agua destilada y completar
exactamente a 100 ml. Almacenar en botella oscura con 50 µl de cloroformo como preservativo.
La concentración de esta solución es de 10000 µg.at/l.

Procedimiento
• Depositar en los viales de reacción, 25 ml de cada muestra de agua filtrada
• Agregar a cada frasco...