determinacion de proteinas

Páginas: 8 (1801 palabras) Publicado: 18 de junio de 2013


Proteinas 1:
En este práctico realizamos una practica que consistía en el reconocimiento de proteínas a  distintas muestras como ser leche, gelatina, clara de huevo y aspartamo.
La idea de este práctico es  mediante dos métodos diferentes  el Biuret y Xantoproteico, extraer de las muestras las  proteínas para así poder identificar su naturaleza proteica.

Objetivos:

-Extraer lacaseína de la leche y reconocer su naturaleza proteica.
-Utilizar misma técnica para reconocer la naturaleza proteica de otras muestras.

Materiales:                                Reactivos utilizados:
Vaso de Bohemia                       Leche descremada en polvo
Varilla de vidrio                         Gelatina
Mechero                                     Clara de huevoSoporte                                       Edulcorante
Tela metálica                             Acido etanoico 2.0M
Gradilla                                      NaOH al 10%
Tubo de ensayo                         CuSO4 al 1%
Termómetro                               Ácido nítrico concentrado
Papel de filtro                            Agua

 ¿Qué se pretende identificar con el ensayo de biuret?

El reactivo de Biuret sepretende utilizar para  la determinación o  identificacion de proteínas, péptidos que presenten enlaces pepiticos(2 o mas) en una muestra .

¿Qué criterio se utiliza para determinar si el mismo resulta positivo o negativo?

En este caso utilizamos Hidróxido de sodio y Tartrato de Sodio de Potasio.El Hidróxido de sodio no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario paraque tenga lugar.
  El criterio para determina si la muestra de estudio resulta positiva o negativa ,se debe a que el reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta.por lo cual si la solución final nos da una coloración violeta , se refiere a que se ha detectado una presencia de proteínas o mejor dicho de enlacespeptidicos.

¿Qué se pretende identificar con el ensayo de la reacción xantoproteica?

se pretende utilizar para determinar la presencia o no de proteínas en una muestra.
Esta reacción se debe a la presencia de un grupo fenilo en la molécula proteica. Los complejos de la molécula proteica que son de importancia en esta reacción son la tirosina y el triptófano. La fenilalanina no reacciona enlas condiciones que se realiza en el laboratorio.  La reaccion xantoproteica  a su vez se puede considerar como una sustitucion electrofilica aromática .. de los residuos de tirosina de las proteinas por el acido nitrico que reacciona.  

¿Qué criterio se utliza para determinar si el mismo resulta positivo o negativo?

La prueba da resultado positivo en aquellas proteínascon aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente en presencia de tirosina, dando un compuesto coloreado amarillo a pH acido. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali, se torna color amarillo oscuro a naranja.

¿Cómo se lleva a cabo la reacción de Biuret? 

La Prueba de Biuret es un ensayo general para las proteínas. Cuando una proteína reacciona con el cobre (II) sulfato (azul), laprueba positiva es la formación de un complejo de color violeta.








ampliacion del resultado de la reaccion de biuret

La prueba de biuret funciona para cualquier compuesto que contenga dos o más de los siguientes grupos:





¿Cómo se lleva a cabo la reacción xantoproteica ? 




se representa  la producción de un producto de color amarillo en la adición de ácidonítrico.realizado en un ensayo para detectar la presencia de tirosina y triptófano en una proteína.

¿Cómo se lleva a cabo esta práctica?

Para la extracción de la caseína de la leche:
Comenzamos por colocar una punta de espátula de leche en polvo y la agregamos 50 mililitros de agua para luego calentarla hasta aproximadamente 40 grados ,agitando siempre con una varilla de...
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