determinacion de seroalbumina bobina









Resumen :
La practica tuvo como objetivo general la cuantificación de proteínas en jugo Ades por el método de Lowry, asimismo se procedió a la formación de las distintas disoluciones con las cuales trabajamos y utilizamos mas tarde para medir las absorbancias (en un máximo de absorción a 752 nm) mediante técnicas espectroscópicas (espectro de absorción), ya que solo algunosresiduos de aminoácidos absorben luz en el UV, por reacciones colorimétricas cuantificamos tales proteínas.
A partir de una sustancia de concentración conocida (BSA) pudimos acceder a determinar la cantidad de proteínas que era nuestra muestra problema siendo la concentración de proteínas en jugo Ades de [1,2±12,2]mg/mL y en un suplemento deportivo [0,6±0,9]mg/mL.
Introducción:

En la practica esfundamental la utilización del espectrofotómetro ya que nuestras proteínas a analizar absorben en el UV y a esto se le llama Absorbancia ,que es la cantidad de intensidad de luz que absorbe la muestra. Está definida como:


Siendo  la intensidad emergente de la muestra después de la absorción, e  la intensidad de la luz que se hace incidir en la muestra.
Mientras que la Transmitancia de unasustancia en solución es la relación entre la cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra I, y la cantidad de luz que incidió sobre ella, y se representa normalmente en tanto por ciento: %T = X 100

La Transmitancia decrece exponencialmente y la Absorbancia aumenta linealmente a medida que se incrementala concentración o el camino óptico atravesado por la radiación.
Mediante la Ley de Lambert-Beer, que expresa la relación entre la luz monocrómica y concentración de un cromóforo en solución:

A=log I/Io =

Siendo A: absorbancia
: absortividad molar
b: camino óptico
C: concentración molar
La absorbancia de una solución es directamente proporcional a suconcentración, a mayor numero de moléculas mayor interacción de la luz con ellas; también depende de la distancia que recorre la luz por la solución a igual concentración ,cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra mas moléculas se encontrará ; y por último depende de , una constante de proporcionalidad denominada coeficiente de extinción que es específica de cada cromóforo .Como A esadimensional ,las dimensiones de dependen de las de c y L. la segunda magnitud (L) se expresa siempre en cm mientras que C se hace siempre que sea posible en M, con lo que las dimensiones de resultan ser M-1 cm-1.
La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas ;para valores de c altos, ε varia con la concentración ,debido a fenómenos de dispersión de la luz, agregación de moléculas,cambios del medio,etc.
La representación de Lambert -Beer nos permitirá calcular el valor del coeficiente de extinción molar ,que corresponde a la pendiente de la recta .
Desviaciones de la ley de Beer:
Las desviaciones a la Ley de Beer caen en tres categorías: reales, instrumentales y químicas. Dichas desviaciones pueden ser positivas, si la absorbancia medida es mayor que la real o negativas sila absorbancia medida es menor que la real y llevan a que no se obtengan relaciones lineales entre la absorbancia y la concentración.
Las desviaciones reales provienen de los cambios en el índice de refracción del sistema analítico, pues como e depende del índice de refracción de la muestra, la ley de Beer sólo se cumple para bajas concentraciones.
Las desviaciones instrumentales provienen, enprimer lugar de la utilización de luz no monocromática, ya que la pureza espectral del haz de radiación proveniente de la fuente, depende del ancho de banda espectral del monocromador. La deducción de la ley de Beer supone radiación monocromática y los monocromadores en realidad proporcionan una banda de longitudes de onda.
En el máximo de la curva del espectro de absorción, el coeficiente de...