DETERMINACION MICROHEMATOCRITO














UNIDAD 3: CARACTERISTICAS GENERALES DE LA SANGRE


(PRACTICAS ASOCIADAS)













VANESA ESCOBAR GRAGERA
PRACTICA 4: Determinación de hematocrito mediante micrométodo.

FUNDAMENTO TEORICO:
Esta determinación está basada en la mayor densidad de los hematíes con respecto a los demás componentes de la sangre. Debido a esta mayor densidad loshematíes tienden a sedimentar hasta el fondo del tubo y así se puede observar el volumen que ocupan respecto al volumen total. Este proceso se acelera en el laboratorio con la centrifugación.
El HTC puede determinarse por métodos manuales o por métodos automáticos. Los métodos manuales consisten en la centrifugación de la sangre, aplicándola una fuerza de 2000 a 5000 g (macrométodo) o de 12000 a 15000 g(micrométodo).
En este método se emplean tubos capilares que fueron especialmente diseñados para utilizar un volumen de sangre pequeño aunque son suficientemente largos para que la medición sea precisa.
El hematocrito es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de sutamaño. El resultado se expresa en porcentaje.
El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo (hemograma).
OBJETIVO:
Aprender a realizar la prueba del hematocrito utilizando el micrométodo, conocer su importancia en el diagnóstico de enfermedades y la forma adecuada de su procedimiento.
MATERIAL:
Papel fieltro.
Papel secamanos.
Pipeta Pasteur.
Plastilina.Capilares sin Heparina.
Muestra de sangre.
Tubo eppendorf.
Gradilla.
Microcentrífuga.
MUESTRA:
La muestra de sangre viene anticoagulada con EDTA.




PROCEDIMIENTO:
La determinación debe hacerse por duplicado siguiendo los siguientes pasos:
1º Toma de muestra. Al estar anticoagulada con EDTA homogeneizamos bien la muestra ya que los hematíes pueden quedar al fondo.
2º Pipeteamos un pocode sangre del tubo de muestra y lo pasamos al tubo de eppendorf.
3º Medimos las ¾ partes del capilar que de 7 cm son 5,25 y hacemos una marca con el rotulador.
4º Llenamos los dos capilares a la vez inclinando el eppendorf y los capilares inclinando tanto el capilar como el tubo de eppendorf. Al pasarme un poco en uno con un poco de papel seca manos fui absorbiendo poco a poco la sangre sobrantehasta dejarlo en la marca.
5º Limpiamos los capilares y los ocluimos con plastilina por el lado que no ha estado en contacto con la sangre. Quedando así:

6º Colocamos en la centrifuga de capilares con la plastilina tocando en la pared del borde externo, estando bien equilibrados y enfrentados. Nos apuntamos el nº en el que los dejamos situados en este caso 35 y 17 y una vez llena se cierra.La centrifuga de capilares tiene una velocidad estandarizada de 12.000 rpm con lo cual no hace falta ponerla, lo que si ponemos es el tiempo que será de 5 minutos.
7º Una vez que finalizan los 5 minutos tras una centrifugación de la sangre total se pueden apreciar dos niveles, uno con el depósito de los glóbulos rojos, principalmente y en color rojo oscuro, otra capa blanca, de leucocitos y unadelgada de color gris, que son plaquetas y finalmente otro nivel del plasma total, de un leve color amarillento. 

PROCEDIMIENTO DE LECTOR DE MICROHEMATOCRITO:
1º Situar el capilar en la ranura, con la columna de eritrocitos hacia el punto rojo.
2º Girar el disco central hasta hacer coincidir a la vez:
La línea mas alejada del punto rojo con el final de la columna de plasma.
La línea mascercana al punto rojo, con el inicio de la columna de eritrocitos.
La línea central, con la interfase de separación presente entre el plasma y los eritrocitos.
Leer en la escala inferior, el valor del HTC.

CALCULOS Y RESULTADOS:
TUBO 1:
Total: 5.22
Hematíes: 2.43
Cálculos:
5.22 → 100 5.22x=2.43*100
2.43 → x x=46.55%
TUBO 2:
Total: 5.4
Hematíes: 2.49
Cálculos:
5.40 → 100...