Determinacion D La Hemoglobina

*Determinación de hemoglobina (Hb)
Fundamento:
Es una proteína conjugada de color rojo integrantes de los eritrocitos entre un 31-34%.
Existen varios métodos para determinación como hematinaácida, hematina alcalina, oxihemoglobina, carboxihemoglobina y cianometahemoglobina; éste último es el de elección por que es estable en soluciones diluidas, porque existen en el mercado estándares decianometahemoglobina y porque las lecturas se pueden hacer en espectrofotómetro de uso común y corriente.
La sangre se hemoliza por agregado de un agente densoactivo, con el ferrocianuro de potasio seoxidan el átomo de fierro de ferroso a férrico para producir metahemoglobina. El cianuro de potasio estabiliza la metahemoglobina pasando de cianometahemoglobina. La cloración producida es directamenteproporcional a la concentración de hemoglobina presente.
Material:
* Tubos de ensayo de 13 x 100 ml
* Pipetas de 1ml
* Pipetas de Salí
* Boquillas
* Gradillas
* Gasa
*Celdas para espectrofotómetro
* Sangre capilar o venosa con anticoagulante.
Reactivos:
* EDTA al 10 % (.07 ml por .5 ml de sangre)
* Reactivo DE Drabkin:
-ferrocianuro de potasio
-cianurode potasio
-bicarbonato de potasio
* Solución estándar de cianometahemoglobina.
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Procedimiento:
1.- Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de reactivo de Drabkin
2.- Homogeneizar bien lasangre
3.- Llenar en sangre hasta la marca de la pipeta de Sahli
4.-Mezclar la sangre con el disolvente
5.- Dejar Reposar 10 min. Para la formación de cianometahemoglobina
6.- leer a 540 nanómetros enel espectrofotómetro contra un blanco de reactivo.
7.- comparar con la curva calibrada de estándares.
Valores de referencia:
Mujeres: 12 -14 gr/dl
Mujeres embarazadas: 11-14 gr/dl
Hombres:13-19gr/dl
Recién nacidos: 13.19gr/dl
* DETERMINACIÓN del hematocrito
Es sencillo y exacto y es importante para determinar los índices eritrocitarios
Fundamento:
El hematocrito mide el porcentaje...