Determinación De Glucosa En Suero

PRACTICA 1
DETERMINACIÓN DE GLUCOSA EN SANGRE VENOSA EN AYUNAS

OBJETIVO
Determinar la concentración de glucosa en sangre venosa mediante una prueba enzimática – colorimétrica en ayunas en una muestra sérica.
INTRODUCCIÓN
Desde el punto de vista biomédico la glucosa es el monosacárido de mayor importancia. Casi todos los tejidos tienen un cierto requerimiento de glucosa, en el cerebroeste requerimiento es muy considerable y los eritrocitos usan la glucosa como única fuente de energía. Para la utilización de la glucosa como fuente de energía se metaboliza mediante una vía denominada glucolisis. La cantidad de glucosa presente en el líquido extracelular es mínima, aproximadamente 20 g. En consecuencia, para asegurar el aporte de glucosa al cerebro y otros tejidos se almacena enforma de glucógeno, el principal carbohidrato de almacenamiento, aunque la cantidad de glucógeno es nuestro cuerpo no es muy grande, aproximadamente 75 g en el hígado y 400 g en músculo. La glucosa la principal fuente de energía al inicio del ejercicio. Los carbohidratos de la dieta son ingeridos y absorbidos en el intestino delgado y pasan a la sangre. En un período de 30-60 minutos después dela comida se alcanza el nivel máximo de concentración de glucosa en sangre, que es de aproximadamente 130 mg/dl (7.2 mol) y que disminuye en aproximadamente 2 horas a 70 – 90 mg/dl. Por la sangre la glucosa llega al hígado donde se almacena en forma de glucógeno o la fosforila a glucosa 6-fosfato. 1 2 5
Metabolismo de la glucosa
Glucolisis
La glucolisis es la vía principal para elmetabolismo de la glucosa, ocurre en el citosol de las células. Funciona de manera aerobia y anaerobia y tiene como producto final Piruvato o Lactato respectivamente. 1
La escisión de la glucosa, de 6 carbonos, para rendir dos moléculas de Piruvato, de 3 carbonos, en presencia de oxigeno, se lleva a cabo por la acción secuencial de 10 enzimas. Las primeras cinco etapas constituyen la etapa preparatoria,en estas reacciones se fosforila enzimáticamente la glucosa mediante el ATP, primero en el carbono 6 y después en el carbono 1, formando fructuosa 1,6- bifosfato, que se escinde en dos mitades rindiendo dos moléculas de gliceraldehído 3-fosfato. Se debe de tener en cuenta que se deben de consumir dos moléculas de ATP, para activar la molécula de glucosa. Otras hexosas, particularmente laD-fructuosa, D-galactosa y la D-manosa pueden incorporarse en la fase preparatoria de la glucolisis, después de haber sido fosforiladas. La fase preparatoria de la glucolisis sirve para recoger las cadenas carbonatadas de todas las hexosas metabolizadas en forma de un producto común que es el gliceraldehído 3-fosfato. La segunda fase de la glucólisis, promovida por las 5 enzimas restantes, representa elpago de la glucólisis, ya que la energía liberada al convertirse dos moléculas de gliceraldehído 3-fosfato a dos moléculas de Piruvato, se conserva en la fosforilación acoplada de cuatro moléculas de ADP a ATP. Aunque las cuatro moléculas de ATP se forman en la segunda fase, el rendimiento global es de dos moléculas de ATP por molécula de glucosa empleada, ya que en la primera fase de la glucólisisse consumen dos moléculas de ATP. 1 3 4 5
Glucogenogénesis y glucogenólisis
El eritrocito y el cerebro tienen un requerimiento absoluto de glucosa sanguínea para el metabolismo energético. Estas células consumen aproximadamente el 80% de los 200 g de glucosa consumida en el cuerpo cada día. En el plasma y en el volumen de líquido extracelular solo hay aproximadamente 10 g de glucosa, de talmanera que el contenido de glucosa sanguínea debe rellenarse constantemente. De otra manera, aparece hipoglucemia que compromete a la función cerebral. 5
El glucógeno es un almacenamiento de la glucosa en forma de polisacáridos. Durante e inmediatamente después de una comida, la glucosa se convierte en el hígado en glucógeno (proceso conocido como glucogenogénesis). El glucógeno hepático se...