Determinación de la concentración de azúcares reductores en Malus domestica (Rosaceae) por un método fotométrico

Determinación de la concentración de azúcares reductores en Malus domestica (Rosaceae) por un método fotométrico
Héctor Urzagasti*, Andrei Gonzales I., Luz Ramos, Amanda Fernández, Mariel Guzman & Diana Alvarez
*Autor de correspondencia: nivardohum@hotmail.com
Carrera de Biología-Universidad Mayor de San Andrés



RESUMEN
A lo largo de la historia saber las concentraciones decarbohidratos en las estructuras de los seres vivos, nos ayuda a encontrar explicaciones en su desenvolvimiento del medio. Determinar la concentración de azucares reductores depende en gran medida de varios factores como el método, reactivos, dilución y temperatura. El objetivo del trabajo es determinar la concentración de azucares reductores en la manzana (Malus domestica). Se utilizó para el experimentoel método de análisis fotométrico de Somogyi-Nelson por su capacidad de medir cifras significativas muy bajas. Los resultados se calcularon a través de un regresión lineal y mínimos cuadrados dándonos un valor de 4,17% en peso de azúcares reductores presentes en M. domestica. Este resultado no concuerda con la bibliografía consultada, debido a que se obtuvo un error al realizar las disoluciones deconcentraciones bajas y tener baja cantidad de datos de absorbancia, donde el valor promedio real de azucares reductores en la manzana es de 10.15%. Se sugiere utilizar modificaciones alternas del método Somogyi-Nelson para poder mayor precisión y eficacia en los resultados.
PALABRAS CLAVE: Azúcar reductor, Manzana (Malus domestica), Reactivo de Smogyi-Nelson, Método fotométrico, Absorbancia,Concentración





INTRODUCCIÓN
Saber los contenidos nutricionales de los alimentos han sido de mucha importancia a lo largo del tiempo, siendo los carbohidratos una de las biomoléculas más abundantes en la naturaleza, desde este punto de vista es importante que estos compuestos como glucosa, fructosa, maltosa, maltotriosa, maltopentosa y dextrinas, entre otros (Gonzales & Castellanos,2003) puedan cuantificarse mediante técnicas objetivas, confiables y reproducibles para así tener mayor comprensión de las funciones estructurales y químicas que poseen en los seres.
La concentración de azucares reductores depende en gran medida de varios factores en el siguiente orden: método, reactivos, dilución, temperatura. Los azucares reductores son carbohidratos que están caracterizados porreaccionar como agente reductor frente a reactivos oxidantes metálicos como el reactivo de Tollens, Fehling y Benedict (McMurry, 2008). Sin embargo, Se utilizaron varios métodos para la concentración de dichos azucares, como la cromatografía de papel, el uso de 3-metil-2-benzotiazolinonehidrazona (MBTH) como cromóforo, el Ácido 3,5-dinitrosalicilico, el método de cromatografía líquida de altaresolución (HPLC), el método de Shaffer and Hartmann, los volumétricos de ferricianuro (NTC 926) o de Eynon – Lane, el gravimétrico de Allihn, DNS y DNS – fenol, sin embargo uno de los métodos más sencillos y rápidos es el análisis espectrofotométrico de Somogyi-Nelson (Nelson, 1944; Somogyi, 1952; Hodge & Hofreiter, 1972; Maier, 1978; Breuil & Saddler, 1985; Bernal de Ramírez, 1994; Anthon &Barrett, 2002; Gonzales & Castellanos, 2003; Mederos et al. 2014).
El método de Somogyi-Nelson, altamente reproducible, determina azúcares reductores presentes en concentraciones muy bajas (20 - 180 µg/ml) (Gonzales & Castellanos, 2003), razón por la cual se lo escogió para determinar el porcentaje de azúcares reductores presentes en Malus domestica.
Un azúcar reductor agregado al reactivo de Smogyi,va a producir un precipitado de cobre reducido, en la forma de hidrato cuproso y oxido cuproso, que va a tener un color rojo o amarillo, en su medio básico (pH 9). En estas condiciones se oxidan en su medio ácido (pH 1,2 - 2,0) el arsenato y molibdato del reactivo de Nelson, dando origen a la formación de molibdeno azul, coloración que se mantiene estable por 24-36 horas y que puede leerse...