Determinanción de glucosa

DETERMINACIÓN DE GLUCOSA
La determinación de la glucosa se divide en 2 grupos:
1.  Químicos.
2. Enzimáticos.
1.- PROCEDIMIENTOS QUÍMICOS.
Comencemos con los métodos químicos, lasdeterminaciones químicas de la glucosa se basan en sus propiedades reductoras y debido a la ausencia de especificidad no son muy utilizadas. El método de la ortotoluidina fue el único procedimiento químicoutilizado ampliamente y está basado en la condensación de alsosacaridos tales como la glucosa con una amina aromática y ácido acético glacial, luego se mide con ayuda del espectrofotómetro el colorcaracterístico que da lugar. Este procedimiento es muy peligroso para el laboratorio ya que la ortotoluidina es toxica y cancerígena.
Método de la ortotoluidina.
Procedimiento.
1.- El equipo de trabajo debetrabajar con los sueros y las orinas que corresponden al número de su caso clínico.
2.- Etiquete cuatro tubos de ensaye de la siguiente manera:
a = para el blanco de los reactivos
b = para el suerocontrol
c = para el suero en ayunas
d = para el suero postpandrial
3.- Pipetear las diversas soluciones tal y como se indica en el siguiente cuadro:

4.-Tape los tubos con papel parafilm y mezclecada tubo por agitación y colóquelos en baño María durante 10 minutos.
5. Enfríe los tubos bajo el chorro del agua corriente, cuidando que no penetre agua en el interior de los mismos.
6.- Laconcentración de glucosa en sangre por medio de orto-toluidina se lee a 630 nm en el espectrofotómetro.
7. Ajuste el espectrofotómetro con la solución del tubo blanco dentro de la cubeta delespectrofotómetro a cero absorbancia y sin la cubeta a 100% de trasmitancia.
8.- Efectué la lectura de absorbancia del tubo b, que es el tubo control, puesto que conocemos su concentración de glucosa, y es el quenos servirá para obtener el factor que nos permitirá obtener los valores de los demás tubos.
9.- Efectúe la lectura de los 2 tubos restantes en la escala de absorbancia (ayunas y pospandrial)....