Diagnostico molecular del rotavirus
INTRODUCCIÓN:
✓ El Rotavirus en humanos fue inicialmente descrito en 1973 por Ruth Bishop en Australia
✓ Biopsias de intestino delgado de niños condiarrea severa de origen no bacteriano
✓ Estos virus fueron bautizados con el nombre de ROTAVIRUS (Latín: Rota), por su apariencia a la de una rueda de carreta.
ESTRUCTURA DEL ROTAVIRUS:Se describen tres capas:
1.- La capa interna: Presenta 60 dímeros de proteínas, así como la VP2
2.- La capa intermedia constituida por 260 trímeros de VP6
3.- La capa externaconformada por la VP7 a su vez conformada por 780 copias de glicoproteína
EPIDEMIOLOGÍA:
El Rotavirus provoca en todo el mundo:
❖ 111 millones de casos de diarrea,
❖ 25 millones deconsultas,
❖ 2 millones de hospitalizaciones y se asocia a la
❖ 800.000 de casos de muerte en niños, de las cuales el 6% corresponden a menores de 5 años
En Bolivia se estima quealrededor de 12000 niños fallecen anualmente por diarrea provocada por Rotavirus.
PATOGENIA
Primer paso: Contacto viral con el enterocito
Segundo paso: El virus se fusiona con los lisosomas queprovocan la hidrólisis de la capa proteica dejando libre en el citoplasma al core viral.
Tercer paso: activación del RNA polimerasa viral que produce RNA mensajeros que realizan copias de los 11segmentos del RNA viral; todo esto ocurre después de ocho horas, en el citoplasma del enterocito.
Cuarto paso: Provocará cambios en la permeabilidad de la membrana del retículo endoplásmico rugoso,marcando un incremento en la permeabilidad al calcio, es así como terminaría el ciclo de replicación del virus.
DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE ROTAVIRUS:
DETECCIÓN MOLECULAR DE ROTAVIRUS POR RT-PRC DEUN FRAGMENTO DEL GENOMA VIRAL:
1.- Extracción de los ácidos nucleicos
2.- Transcripción reversa y amplificación por PCR de un fragmento de 186pb del genoma del Rotavirus.
3.- Confirmación...
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