Diapositivas Biologia11

República Bolivariana De Venezuela
Ministerio del Poder Popular Para la Educación
U. E “Iberoamericano”
1ero de Cs “C”
Cátedra: Biología.

Docente:
Integrantes:
Jesús Salcedo.
Cabrera Mónica
CI.:22825043

Puero Ordaz;12 de Febrero del
2008

¿ Qué es la clonación?
Si nos referimos al ámbito de la Ingeniería Genética,
clonar es aislar y multiplicar en tubo de ensayo un
determinado gen o, engeneral, un trozo de ADN. Sin
embargo, Dolly no es producto de Ingeniería Genética.
En el contexto a que nos referimos, clonar significa
obtener uno o varios individuos a partir de una célula
somática o de un núcleo de otro individuo, de modo
que los individuos clonados son idénticos o casi
idénticos al original.

Puerto Ordaz;12 de Febrero del
2008

Tipos de Clonación
• Clonación Molecular
Laclonación molecular se refiere al proceso de aislar una secuencia
de ADN de interés, insertarlo en un plásmido y obtener múltiples
copias de ella en un organismo (generalmente procariota) por
acción de la DNA polimerasa. La clonación se emplea
frecuentemente para amplificar fragmentos de ADN que contienen
genes, un paso esencial en el análisis subsecuente.
Frecuentemente, el término clonación eserróneamente utilizado
para referirse a la identificación de una localización cromosómica
de un gen asociado con un fenotipo particular de interés, como en
la clonación posicional. En la práctica, la localización de un gen en
un cromosoma o región genómica no necesariamente habilita para
aislar o amplificar la secuencia genómica de interés.

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La clonación decualquier secuencia de ADN
incluye los siguientes pasos:
Fragmentación: Inicialmente, el ADN de interés necesita ser
fragmentado para proveer un segmento relevante de ADN de un
buen tamaño. La preparación de los fragmentos para la clonación
se obtiene frecuentemente del PCR, pero también puede hacerse
por medio de la digestión con enzimas de restricción y a veces
fraccionando con electroforesis en gel.Ligación: Un procedimiento de ligación se emplea cuando el
fragmento amplificado se inserta en un vector. Dicho vector (que
generalmente es circular) se convierte en una secuencia lineal
utilizando enzimas de restricción, y es incubado con el fragmento
de interés bajo las condiciones apropiadas con una enzima llamada
ADN ligasa.
Transfección: Después de la ligación, el vector con el gen de
interésse transfecta a una célula. Comúnmente se utiliza la
electroporación, aunque existe un gran número de técnicas
alternativas.
Selección: Las células transfectadas se cultivan. Como este
procedimiento actualmente se considera de baja eficiencia, se
Puertode
Ordaz;12
de Febrero
del sido exitosamente
deben identificar las colonias
células
que han
2008
transfectadas con el vector que contiene el gendeseado.

Clonación celular
Clonar una célula significa derivar una población celular a partir de
una sola célula. Ese es un importante procedimiento in Vitro cuando
se desea la expansión de una sola célula con ciertas características.
Una valiosa técnica de cultivo de tejido utilizada para clonar distintos
linajes de células incluye el uso de aros de clonación (cilindros). De
acuerdo con estatécnica, una suspensión unicelular de células que
han sido expuestas a un agente mutagénico o a una droga utilizada
para propiciar la selección se pone en dilución alta para crear colonias
aisladas; cada una proviniendo de una sola célula potencialmente
clónicamente distinta. En un estado inicial de crecimiento de sólo
unas cuantas células, aros estériles de poliestireno (aros de
clonación), loscuales han sido sumergidos en grasa, son puestos
sobre una colonia individual y una pequeña cantidad de tripsina es
agregada. Las células clonadas se recolectan de dentro del aro y son
transferidas a un nuevo contenedor para mayor crecimiento. La
mayoría de los individuos empiezan como cigotos y por esto resultan
en expansión clónica in Vitro.

Puerto Ordaz;12 de Febrero del
2008

Clonación de...