Diluciones

DILUCIONES
Realizado por: Araceli Contreras Rodríguez Laboratorio de Microbiología General/ Depto. Microbiología, ENCB/IPN

OBJETIVO: Aprender a realizar diluciones y manejar volúmenes. DILUCION: Acción de diluir DILUIR: Añadir líquido (diluyente) a un soluto o solución DILUYENTE O DILUENTE: Líquido que diluye FACTOR DE DILUCION: Total de veces que el soluto, solución o suspensión bacterianafue diluida. DILUCION ACUMULADA: Dilución que se obtiene del producto de las diluciones individuales. Las diluciones se expresan siempre:

1: ________
Volumen total

Las bacterias las podemos diluir en cualquier medio.

1 + 9=10
Volumen soluto 1

Dilución 1:10
Volumen diluyente 9

Otros volúmenes que mantienen una dilución 1:10 0.5:5 (0.5 ml + 4.5 ml) 0.1:1 (0.1ml + 0.9 ml) . . . etc.De esta manera los volúmenes pueden ser variables adecuándonos a la dilución.

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Si yo tengo: 2.1ml (soluto)+7.2ml (diluente) =9.3 vol. Total 2.1 : 9.3 (2.1 en un volumen total de 9.3) entonces tenemos una dilución 1: 4.2 2.1 2.1 0.75ml (soluto) + 2.83ml (diluente) = 3.58ml (volumen total) 0.75 : 3.58 (0.75 en un volumen total de 3.58) entonces tenemos una dilución 1:4.7 0.75 0.75 3.6ml(soluto) + 5.1ml (diluente) = 8.7ml (volumen total) 3.6 : 8.7 (3.6 en un volumen total de 8.7) entonces tenemos una dilución 1: 2.42 3.6 3.6 Es posible que el soluto sea más grande que el diluyente, por ejemplo: 5ml (soluto) + 4ml (diluente) = 9ml (volumen total) 5 : 9 (5 en un volumen total de 9) entonces tenemos una dilución 1: 1.8 5 5 Ahora, si tuvieras que preparar 10ml de una dilución 1:15.3,significa que tengo 1ml + 14.3ml=15.3 1 ---- 15.3 X------10ml X=0.65 Ahora, si tuvieras que preparar 8ml de una dilución 1:25, significa que tengo 1ml + 24ml =25 1 ---- 24 X------8ml X=0.32 0.32 : 8 = 1:25 0.32 0.32 entonces 0.65+9.35=10ml, por lo tanto 0.65 : 10 0.65 0.65 = 1:15.3

entonces 0.32+7.68=8ml, por lo tanto

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FACTOR DE DILUCIÓN Una dilución se puede expresar de las siguientesmaneras:

10-1 = 1/10 = 1:10 El inverso de la dilución se expresa: 1 = 10-1 1 1:10 = 1 1/10

= 10

1 1 1 10

Multiplicamos extremos por extremos y medios con medios

=

10/1 =

10

Por lo tanto el Factor de dilución= 10
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PROBLEMA 1. Si Usted tiene una suspensión bacteriana con 6x109 UFC/ml y la diluye de la siguiente manera: TUBO Suspensión Diluyente Vol. transferenciaDil. Individual Dil. Acumulada Dil. final 1 6 ml 9 ml --1:2.5 1:2.5 12ml 3ml 1:5 1:12.5 12ml 3ml 1:5 1:62.5 1:62.5 Volumen de transferencia 2 3

6ml

3 ml

3 ml

9ml
Suspensión bacteriana

12ml

12ml

Volumen diluyente

6ml 15 9ml

3ml 15 12ml

3ml 15 12ml
Volumen total

Dilución individual

6:15 6 6 = 1 : 2.5 1 : 2.5

3:15 3 3 = 1: 5
multiplicar

3:15 3 3 = 1: 5multiplicar

Dilución acumulada

1 : 12.5

1 :62.5

Dil. final

Factor de dilución 62.5

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Para calcular las UFC en cada tubo, se divide la concentración inicial bacteriana entre la dilución acumulada de cada tubo
6x109=2.4 x 109 UFC/ml 2.5 6x109=4.8x108 UFC/ml 12.5 6x109= 9.6 x107 UFC/ml 12.5 tubo 1 tubo 2 tubo 3

O también puedes dividir la concentración bacteriana de cada tuboentre la dilución individual:
6x109=2.4 x 109 UFC/ml 2.5 2.4x109=4.8 x 108 UFC/ml 5 4.8x108= 9.6x109 UFC/ml 5 tubo1 tubo 2 tubo 3

Tubo1

tubo 2

tubo 3

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PROBLEMA 2. Partiendo de una suspensión bacteriana de 9x106 UFC/ml indique que diluciones en serie haría para obtener un suspensión con 1x102 UFC/ml. No puede exceder diluciones más grandes de 1:5.

9x106
Para conocer ladilución final:

1x102

DILUCIÓN FINAL=CONCENTRACIÓN INICAL= 9X106 = 1:90,000 ………………………..CONCENTRACION FINAL 1X102

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

Suspensión bacteriana 4ml 4ml 4ml 4ml 4ml 4ml 4ml
0.15 ml

Dil. Indiv. 1:5 Dil. acumulada

1:5
1:5

1:5
1:125

1:5
1:125

1:5
1:625

1:5

1:5

?

1:1.152

*

1:3,125 1:15,625 1:78,125

? 1:90,000...