discuciones

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

DETERMINACION DE COLESTEROL EN SUERO:
TUBOS

BLANCO
STANDARD
MUESTRA
Standard

40 ul

Muestra


40 ul
Reactivo del trabajo
4 ml
4 ml
4 ml

Seprocedió a colocar las soluciones mencionadas en el cuadro, en los tubos respectivos.
Luego se llevo a incubar a 15’ en baño maría a 37° C
Procedimos a leer los tres tubos en el espectrofotómetro a 505 nm.Calculamos la concentración de colesterol total en suero aplicando el método de factor de calibración. [Colesterol] = Fc x D.O
Para lo cual tenemos que la concentración del stardard es [standard] = 200 mg%
Recordar que para el REACTIVO DE TRABAJO: de acuerdo al volumen de trabajo se debe colocar en una probeta 50 partes de agua destilada, 5 partes de reactivo 4-AF, 5 partes de reactivofenol y se llevo a 100 partes con agua destilada. Agregar 2 partes de enzimas (lipasa fungal, colesterol oxidasa y peroxidasa) previamente homogenizadas y se mezclar por inversión sin agitar.DETERMINACION DE COLESTEROL HDL EN SUERO:
TUBOS

BLANCO
STANDARD
MUESTRA
Standard


200 ul
Muestra (HDL)

40 ul
-
Reactivo del trabajo
4 ml
4 ml
4 ml

En un tubo se agrego 100 ul de Sulfatode Dextran + HC3-2 y 1 ml de la muestra, luego homogenizarse por 20´´sin invertir, refrigerarlo por 30´ y centrifugar a 3000 rpm por 15’.
Luego se uso al sobrenadante como muestra (HDL).
Se procedióa colocar las soluciones mencionadas en el cuadro, en los tubos respectivos.
Luego se llevo a incubar a 15’ en baño maría a 37° C
Procedimos a leer los tres tubos en el espectrofotómetro a 505 nm,llevando a cero con agua destilada.
Calculamos la concentración de colesterol HDL en suero aplicando el método de factor de calibración. [HDL] = Fc x D.O
Para lo cual tenemos que la concentracióndel stardard es  [standard] = 45.7 mg%
Recordar que el REACTIVO PRECIPITANTE: contiene una solución de Sulfato de Dextran y de Cl2Mg.H2O
DETERMINACION DE COLESTEROL LDL EN SUERO:
TUBOS...