Discusi N Reporte Inmuno Electroforesis

Páginas: 2 (468 palabras) Publicado: 20 de mayo de 2015
Discusión
En esta práctica se realizó una electroforesis de proteínas aplicando el método Western Blot para su transferencia y observación comparándolo con el marcador de peso molecular.
Al iniciose realizó una extracción de sangre venosa, con el fin de la centrifugación de esta y separar cada uno de los componentes, de donde se realizó la separación en un tubo eppendorf del plasma separado yposteriormente el método de cuantificación. Se realizó la preparación del gel de acrilamida en un ___%, así como la preparación de las muestras con reactivo SDS, lo utilizamos como agente disociador ypara desnaturalizar proteínas, cuando es calentado junto con las proteínas, recubre el poli péptido manteniendo el eje central desplegado.
Después se realizó cada uno de los geles, tanto concentradorcomo separador, los cuales sirven cada uno para:
Gel concentrador
Gracias al pH 6.7 del TRIS proporciona el ambiente para realizar la reacción de Kohlrausch para determinar la conductividad molar, ycon esto, las proteínas recubiertas con SDS se concentran y formar una zona de inicio.
GEL separador
En este gel es donde se lleva a cabo la separación de macromoléculas de acuerdo a su tamaño.
Cadauno se realizó con acrilamida, Lo utilizamos en solución acuosa, por lo cual se realizó una auto polimerización, en este gel se llevó a cabo la reacción de polimerización vinílica, en la cual losmonómeros de acrilamida se activan, quedando como radicales libres, y reaccionan formando polímeros de cadena larga, lo cual en este gel se observó nuestra separación de proteínas, la bisacrilamida juntocon este gel hace que las cadenas queden trabadas, por lo cual se apreció mejor la separación.
Asi también se agrego el reactivo TEMED, Cuando se aumenta su contenido, se disminuye la longitud de lacadena del polímero aumentando la turbidez del gel, por lo cal utilizamos la concentración menor para realizar la polimerización en un tiempo óptimo.
posteriormente se realizó el corrimiento y la...
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