Distribucion de los acidos nucleicos

DISTRIBUCIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS EN LOS TROFOZOITOS DE
ACANTHAMOEBA CASTELLANII DURANTE LA DIVISIÓN NUCLEAR.
El estudio de la reproducción de los trofozoitos de Acanthamoeba castellani hatomado
interés por el aumento de pacientes con diagnóstico de encefalitis amibiana
granulomatosa[1]. Poco se sabe acerca de la mitosis de estos protozoarios patógenos. Se
ha reportado que la divisiónnuclear en Acanthamoebas esta caracterizada por la
formación de un huso bipolar con la desaparición del nucleolo y la envoltura
nuclear[2,3]. El propósito de este trabajo fue describir la ubicación delos ácidos
nucleicos en los trofozoitos de Acanthamoeba castellanii durante la mitosis. Para ello,
se emplearon los trofozoitos de A. castellanii aislados del líquido cefalorraquídeo de unpaciente con diagnóstico de encefalitis amibiana granulomatosa. 1 x 10
parásitos se
sembraron en botellas de plástico de 50 ml y se cultivaron con el medio Diamond TYIS-33
adicionado
con
suero
debovino
adulto
* al
* 10
%
durante
5
días
a
37°C
hasta
obtener

la

sincronización por agotamiento de nutrientes. Para determinar la distribución de los
ácidos nucleicos durante lamitosis, se resembraron los parásitos de Acanthamoeba
castellani en una placa de cultivo de 6 pozos con medio nuevo y suero de bovino adulto
al 15%. A continuación se obtuvo una muestra cada 40minutos durante 4 horas. Cada
muestra se tiñó vitalmente con naranja de acridina al 0.07% durante 45 segundos,
después las células se lavaron con PBS pH 7.3 a 37° C. y luego se montaron en
portaobjetosy se sellar con barniz. Las preparaciones se observaron en el microscopio
de fluorescencia y se tomarán fotografías con película kodak Asa 800. La tinción de los
trofozoitos de A. castellanii connaranja de acridina mostró al DNA de color verde y al
RNA nuclear e intracitoplasmático de color rojo o naranja. La distribución del DNA
intranuclear adoptó la forma de una dona. En cambio, el RNA...