Dna- Extracçao Do Kiwi

Extracção de DNA de células do Kiwi

27 de Setembro de 2012
27 de Setembro de 2012



Nesta actividade experimental extraímos uma porção de DNA de uma célula vegetal, com o objectivo de entender os conceitos de genética básica e perceber como podemos identificar e extrair o DNA do kiwi.
Esta macromolécula (DNA) contém as informações genéticas e está presente em todos os seres vivos. Éformado por uma base azotada, uma pentose e um grupo fosfato. Em português, a sigla DNA significa ácido desoxirribonucleico. Esta importante molécula contém as informações básicas para a formação de um ser vivo e para a sua reprodução. As moléculas de DNA são geralmente cadeias muito longas, constituídas por muitos componentes ligados uns aos outros. O suporte de cada cadeia é uma sequência repetidade grupos alternados de fosfatos e açúcares; cada uma das unidades de açúcar da cadeia tem uma de quatro unidades químicas diferentes possíveis que sobressaem de cada um dos lados da cadeia. Estas moléculas, chamadas bases, são a adenina (A), citosina (C), guanina (G) e timina (T). Duas dessas cadeias juntam-se formando a dupla hélice.
O kiwi foi o fruto escolhido para esta experiência, porque éum fruto de fácil manuseamento e obtenção.
No fim da experiência temos como objectivos compreender melhor como esta macromolécula se manifesta nas diversas situações a que é sujeita e consolidar a matéria já dada nas aulas referente a esta experiência.
Ilustração 1- Representação da estrutura do DNA e da complementaridade das bases
Ilustração 1- Representação da estrutura do DNA e dacomplementaridade das bases

Protocolo experimental
Material
* - Kiwi

* - Almofariz
* - Faca
* - Vareta de vidro
* - Placa térmica (banho-maria)
* - Gaze
* - Gobelé
* - Proveta
* - Colher de sobremesa
* - Funil
* - Caixa de Petri

* - Água
* - Detergente da loiça
* - Cloreto de sódio
* - Etanol frio 96% (a 5ºC)
* - FucsinaProcedimento
Começou-se a experiência com o esmagamento do kiwi com a ajuda do almofariz e do pilão; o kiwi já tinha sido previamente descascado com uma faca e cortado em pequenos pedaços. A trituração do kiwi perdurou até este se tornar numa polpa. De seguida preparou-se uma solução com 3 gramas de cloreto de sódio (medidos com a ajuda da colher de sobremesa), com 10ml de detergente da loiça e100ml de água num gobelé; esta solução após ter sido homogeneizada com o auxílio da vareta de vidro, foi transferida para o almofariz onde já se encontrava a polpa do kiwi, para que o processo de esmagamento continuasse e para que a solução preparada fosse misturada com a polpa.
De seguida, verteu-se parte da nova mistura composta pela solução e pela polpa para um gobelé, marcado com o nome dogrupo; após esse passo o gobele foi colocado em banho-maria, com água à temperatura de 37,5º C, durante 15 minutos.
Após este período de tempo o gobele com a mistura foi retirado do banho-maria e 20 ml desta foi filtrada com o auxílio de gaze e de um funil para um copo volumétrico; de seguida o liquido obtido foi transferido para uma proveta.
Com o preparado filtrado na proveta foi adicionado 20ml de etanol frio, sem efectuar uma homogeneização da nova mistura.
A nova mistura, constituída pelo preparado filtrado e pelo etanol foi deixado a repousar até que uma massa gelatinosa esbranquiçada aparecesse, o que demorou cerca de 6-7 minutos.
Quando já era visível uma grande camada gelatinosa (DNA), foi adicionado à mistura 4 gotas de fucsina, para que corasse essa camada, tornando assimmais fácil a visualização do DNA.
Ilustração 2-Gobeles com as várias misturas a aquecerem em banho-maria
Ilustração 2-Gobeles com as várias misturas a aquecerem em banho-maria

Ilustração 3-Transferência de álcool etílico para o resto da mistura com o auxílio de um funil.
Ilustração 3-Transferência de álcool etílico para o resto da mistura com o auxílio de um funil.

Resultados

Os...