DNA Fingerprinting

DNA fingerprinting
• Técnica utilizada de forma habitual para distinguir entre individuos.
• Es posible gracias a la tecnología que permite la detección precisa y la
amplificación de pequeñascantidades de DNA así como también el
hecho de que los organismos poseen secuencias repetidas de DNA
que existen en el genoma en diferente numero y disposición.

Secuencias VNTR (númerovariable de repeticiones en tándem)
• Una repetición en tándem es una secuencia corta de ADN (20 a 100pb),
que se repite consecutivamente en un locus cromosómico específico.
• Se encuentranrepartidas por todo el genoma humano y algunas de ellas
se han identificado ya.
• Como los patrones de VNTR se heredan genéticamente, el patrón de una
persona es más o menos único.

Identificación delos VNTR´s
• El ADN genómico es digerido con enzimas de restricción que reconocen sitios
adyacentes a la región repetida.
• Cuando se digiere el DNA de dos cromosomas con diferente numero derepeticiones en un locus particular, los fragmentos de restricción que contienen
este DNA difieren de tamaño, ha esta diferencia se le denomina polimorfismo de la
longitud de los fragmentos derestricción o RFLP.
• Los fragmentos se separan por electroforesis en gel y los fragmentos que contienen
VNTR pueden identificarse mediante Southern Blot (se inmovilizan en una
membrana y sedetectan a través del uso de sondas fabricadas a partir de la
secuencia de VNTR)

• El uso de la PCR resulta imprescindible cuando la cantidad de DNA de la
muestra es muy pequeña (como la que seencuentra en la raíz de un
solo cabello).
• Para utilizarla es necesario conocer las secuencias que rodean un sitio
particular que contiene VNTR de modo que se puedan sintetizar los
iniciadores.• Como la PCR solo amplifica el DNA entre los iniciadores, no se requiere
cortar con enzimas de restricción antes de introducirlo al gel.

Uso de VNTR’s en el DNA
fingerprinting

Ejemplo: