DNA plasmidico




Aislamiento de DNA Plasmídico.

Introducción.
Los plásmidos son moléculas de DNA extracromosomal los cuales están presentes en algunas células bacterianas, levaduras y hongos. Los mismos poseenDNA de doble hebra, mayormente son circulares pero también se han encontrado plásmidos lineales. La replicación de los plásmidos es independiente de la replicación del cromosoma del huésped ya que losplásmidos poseen su propio origen de replicación.
Los plásmidos no son esenciales para el desarrollo o supervivencia de la célula pero le proveen una ventaja competitiva a las células que los poseen,dado a que los plásmidos poseen genes que le confieren características selectivas a su huésped tales como resistencia a antibióticos, nuevas habilidades metabólicas como degradación de carbohidratos,factores de virulencia y producción de toxinas entre otros.
Los plásmidos poseen un interés singular en Ingeniería Genética por ser uno de los sistemas vectores más sencillos de usar. Un vector declonación es un sistema que permite introducir en una célula hospedadora un fragmento de DNA que se pretende clonar; en esta célula hospedadora el vector se replica y expresa, en su caso. La moléculaque resulta de la unión de un DNA vector con el DNA de interés (denominado entonces "inserto") se denomina molécula de vector recombinante.
Objetivo
•Obtener DNA plásmido pUC18.
•Realizar unaelectroforesis en gel de agarosa del plásmido obtenido y discutirá sobre las formas moleculares obtenidas.




Resultado
Imagen de la Electrofóresis en gel agarosa a 85 V













Electrofóresis enbibliografía.





Discusión
El método empleado para la obtención del plásmido se denomina de lisis alcalina. Se basa en la desnaturalización y precipitación selectiva del DNA cromosómico en medios con NaOHy SDS. En estas condiciones el DNA plasmídico permanece intacto debido principalmente a su pequeño tamaño y su naturaleza circular y súper enrollada. El tratamiento con alta concentración de sal...