Dna Pol 2
Una ADN polimerasa es una holoenzima que utiliza los dNTPs (desoxirribonucleótidos) o los ddNTPs (didesoxirribonucleótidos) para alargar el terminal 3' de un cebador (a primer) emparejadoa una molécula de ADN simple que utiliza como plantilla o molde.
Todas las ADN pol conocidas sintetizan el ADN en la dirección 5' a 3'. Ninguna ADN pol conocida es capaz de comenzar una nuevacadena. Ella sólo puede añadir un nucleótido en un grupo 3'-OH que ya existe. Por esta razón la ADN pol necesita un cebador al grupo 3' -OH del cual puede añadir el primer nucleótido.
Los cebadores sonmoléculas de ADN o ARN. La longitud mínima de un cebador esta de 17 nt. Usted tiene que o sintetizarlos o comprarlos. Cualquier estudiante debería saber escoger y como comprar un par de cebadores.El ión de Magnesio:
ADN pol es un holoenzima. Esta requiere un co-factor, un ión de Magnesio, para funcionar correctamente. Sin el ión de Magnesio, esta enzima esta es sólo una apoenzima.
Un"holoenzima" es la forma completa y activa de una enzima con múltiples subunidades o la combinación de un apoenzima con su cofactor.
Una apoenzima es una enzima sin su cofactor o sin sus múltiplessubunidades. Para las ADN pols, el cofactor es el ión de magnesio.
En la reacción catalizada por ADN pol, los cebadores y el ADN quelatan el ión de magnesio. Entonces la concentración de este ióntiene que ser medida para cada reacción. A veces, hay que añadir el ion magnesium.
dNTPs, ddNTPs y el ADN Pol
Los dNTPs son dATP, dTTP, dGTP ADN dCTP. Para el secuencaje de ADN, se necesitan una mezclade dNTPs y ddNTPs (nucleótidos didesoxi). Los nucleótidos didesoxi son nucleótidos modificados que han perdido el grupo hidroxilo de la posición 3' de la desoxiribosa. La ADN Pol puede incorporarestos ddNTPs a la cadena de ADN naciente. Pero no es posible que se una a estos ddNTPs ningún otro nucleótido por el extremo 3'. Por tanto, una vez icorporado un nucleótido didesoxi, se termina la...
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