DNA y algo maaas

ufeffTranscripción reversa

Fundamento de la Transcripción reversa
La transcripción reversa es una técnica que permite sintetizar ADN complementario (cDNA) a partir de moléculas de ARN usando paraello la enzima transcriptasa reversa. El cDNA obtenido es la cadena complementaria de la cadena molde de ARN.
El fundamento molecular de la transcripcion reversa en retrovirus implica la conversiónde dos ARNs de cadena simple con sentido positivo en una molécula de ADN ligeramente más larga que el ARN original debido a la repetición directa de las secuencias colindantes a los fragmentosoriginales (denominadas LTRs, del inglés, long terminal repeats).
Existen varios factores que influencian la eficiencia del proceso, tales como la posesividad de la enzima que va a llevar a cabo estareacción, la presencia de estructuras secundarias en el RNA, etc.
Una transcriptasa reversa con el rendimiento a alta temperatura es importante al transcribir ARN con estructura secundaria o cuando setrabaja con genes específicos de cebadores.
Tipos de primers
Las reacciones de síntesis de cDNA pueden usar una combinación de primers de secuencia específica, (SSPS), oligo dT o random primers.
Elmétodo de purificación en combinación con la estrategia de primers de RNA escogida puede jugar un papel importante en la eficiencia de la síntesis, consistencia y rendimiento de cDNA.
Mientras cada tipode primer tiene sus beneficios y desventajas, el objetivo individual de RNA puede responder diferente a cada tipo de primer. Por lo tanto, cada opción de primer debería ser evaluada para determinarcuál de ellos provee la sensibilidad y precisión óptimas en la síntesis de cDNA.
Primer de secuencia específica
Los primers de secuencia específica, también llamados oligo-específicos, son secuenciasdiseñadas para reconocer y unirse a sólo una secuencia de un organismo en específico.
En la transcripción reversa, se usa cuando se quiere obtener cDNA de una mRNA elegido, para evitar que este...