DNAza

DNasa
Principio:
Determinar la capacidad de un microorganismo de producir la enzima desoxiribonucleasa (DNasa)
Objetivo:
Identificar estafilococos patógenos potenciales; posibles cepas de S.aureus subesp. aureus que no dan una reacción positiva definida a la prueba de coagulasa.; S. aureus subesp. aureus (+), S. epidermidis (por lo general -)
Diferencial entre géneros estrechamenterelacionados de la división Klebsiella-Enterobacter-Serratia de la familia Enterobateriaceae de especies Klebsilla-Enterobacter
Identificar Streptococcus pyogenes del grupo A, que es DNasa positivo en cuatrovariantes antigénicas: A, B, C y D. Siento más común el tipo B.

Bioquímica:
Las enzimas capaces de degradan lo ácidos nucleicos son clasificadas como:
Endonucleasa: hidrolizan un puentefosfodiéster interno, produciendo 3’-OH y 5’-P o 5’P y 3’-OH terminales
Exonucleasas: hidrolizan un nucleótido solo cuando está presente en el extremo de una molécula.
La DNasa es una endonucleasaextracelular específica para la hidrólisis del DNA. La mayoría de DNasas bacterianas requieren cationes divalentes para su actividad, los cuales por lo general son proporcionados por las peptonas en el medio decrecimiento o de prueba.

Los límites del pH para la actividad de la enzima varían entre 5,5 y 8,5 y el pH óptimo es de 7,2. Varias DNasas pueden diferenciarse entre sí por las característicasantigénicas o por las diferencias en la respuesta a inhibidores específicos.
En la hidrólisis, se fragmentan alrededor de la cuarta parte de los puentes fosfodiéster e hidrógeno de los nucleótidosinternos que mantienen secuencias complementarias de nucleótidos de DNA, produciendo una mezcla de oligonucléotidos (cadena de varios desoxirribonucleótidos). Los oligonucleótidos poseen un 3’OH o 3’-Pterminal y/o un 5’-P 5‘-OH terminal.
La degradación parcial (des60 polimerización) por la acción de la DNasa, el calentamiento o los pH extremos desnaturalizan el DNA, con los correspondientes...