ectroforesis


UNIVERSIDAD DE NARIÑO
PROGRAMA MEDICINA

Aura Cárdenas, Alejandra Díaz, Daniela Salazar

ELECTROFORESIS DE ÁCIDO NUCLEICOS
RESUMEN
La electroforesis en gel es una técnica sencilla empleada deforma rutinaria en laboratorios para separar moléculas biológicas especialmente ADN, ARN y PROTEINAS.
CONCEPTO
La electroforesis es una técnica habitual en el laboratorio clínico. Permite separar especiesquímicas (ácidos nucleicos o proteínas) a lo largo de un campo eléctrico en función de su tamaño y de su carga eléctrica. Los ácidos nucleicos, ADN y ARN, tienen por naturaleza carga negativa. Siponemos fragmentos del ADN extraído de una muestra biológica sobre un soporte poroso (gel) y aplicamos un campo eléctrico, se producirá la migración diferencial de los fragmentos a través de los poros dela matriz. La tinción del gel con bromuro de etidio, que es una sustancia fluorescente que se intercala en la molécula de ADN, y la exposición con luz ultravioleta, permite observar el resultado deésta migración. El tamaño de los fragmentos de ADN se puede estimar comparándolos con el patrón de bandas que se obtiene de marcadores comerciales de peso molecular conocido. La electroforesis de ADN esútil para comparar patrones de bandas de diferentes muestras biológicas. Así por ejemplo se puede usar para comparar muestras de individuo sano frente a individuo enfermo, para la identificación deácidos nucleicos de agentes infecciosos o para la obtención de un fragmento determinado de ADN que, una vez localizado en el gel, puede ser extraído para análisis posteriores
GEL AGAROSA: Polímero quefunde a 80- 90 °C (Aunque hay agarosas de muy diversos tipo, entre las que se encuentran las de bajo puntos de fusión), y forman gel a unos 30°C. El rango de concentración oscila entre el 0,3%, quepuede separar moléculas del orden de 5 a 60 Kb, y el 2% que puede separar ácidos nucleicos de 0,1 a o,2 Kb.





CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son las dos funciones del tapón de aplicación de la...