Efecto De La Temperatura En Resultados De Enzimologia Cc

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Control de Calidad

Practica #9
Verificación y efecto de la temperatura en los resultados

Alumna:
Grupo:
5QM1
Equipo:
17
Sección:
4

Profesores:
Dr. Oscar Barrera León
M. en C. Carmen Colín Tovar
M. en C. Hilda PérezCervantes
QBP Marlen Romero García
QBP lucia Soriano Sánchez
M. en C. Luis Carreño Duran

INTRODUCCION
La temperatura es uno de los factores más importantes a considerar en el estudio y control de las reacciones catalizadas por enzimas
La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima.
 Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reaccióndebido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica, y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.
En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento, la velocidad de reacción se duplica.
El efecto de la temperatura sobre los diferentes sistemas cuantificarcalculando el coeficiente térmico Q10 del proceso, que se define como la medida de la tasa de cambio de un sistema biológico o químico como consecuenciamdel incremento de temperatura en 10 °c.
La TRANSAMINASA GLUTAMICO OXALACÉTICA (TGO) es una enzima, se encuentra distribuida en el citoplasma y en las mitocondrias de las células, cumple un rol diagnóstico y de monitoreo de enfermedades con dañohepatocelulares y muscular. No hay evidencia de un aumento de síntesis de transaminasas en enfermedades hepáticas y musculares. La vida media de la TGO es de 17 Hs. lo cual da una información muy actual de la realidad de un proceso citolítico.

La TGO se encuentra en varios tejidos como el músculo cardíaco, hepático, cerebro, páncreas, pulmones, leucocitos y eritrocitos. Un aumento simultáneo de ambasconcluye en un proceso de necrosis hepatocelular de cualquier índole. En algunos casos también se la usa en la evolución del infarto de miocardio (IAM), donde la sensibilidad diagnóstica es del 96% y la especificidad del 86% post angor.
Debido a la localización intracelular de las transaminasas (TGP citoplasmática y TGO citoplasmática y mitocondrial) es que se puede inferir que ante un aumentosignificativo de TGP sobre TGO hay un daño celular difuso con ruptura de membranas celulares y compromiso citoplasmático y con un aumento de TGO>TGP el compromiso necrótico es más profundo y severo
Utilidad clínica
* Evaluar magnitud del daño celular en hígado y músculo.
* Monitoreo de la evolución del daño de los tejidos que la contienen hepatopatía, cardiopatías.
Objetivo
Evaluar yanalizar el efecto que produce el inadecuado control de la temperatura en una reacción de tipo enzimática y valorar su relación con la confiabilidad de los resultados mediante la determinación de Q10 y aplicar los conceptos de calidad aprendidos durante el curso e interpretar los resultados de acuerdo al control de calidad y establecer un criterio de aceptación y rechazo.
Fundamento
La mayoríade las reacciones químicas aumentan su velocidad a medida que aumentamos la temperatura. Un incremento en la temperatura resulta en un importe mayor de energía cinética a las moléculas reactantes, lo que conduce en un mayor índice de colisiones productivas por unidad de tiempo.

METODOLOGIA
Prepara 2 tubos con 1.25 ml del sustrato
Calentar el espectrofotómetro 15 min y ajustar a cero con aguabidestilada a 340 nm
Preincubar a la temperatura de medición (primero a 27°C) por 5 minutos, tanto el suero como el sustrato.

Adicionar 0.25 ml de suero a un tubo, mezclar rápida y suavemente, vaciar a la celda.

Después de tomar las lecturas cada minuto hasta que ya no halla incrementos
Tomar lecturas cada 20 segundos, durante 3 minutos, para observar la fase de retardo (fase lag). Si se...