efecto de la temperatura sobre la glucosa oxidasa

PRACTICA N° 3
EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA GLUCOSA OXIDASA

Fundamento:
La temperatura óptima para la acción de enzimas es la temperatura del cuerpo de los animales q oscila en elintervalo de 36 a 41°C. Un aumento pequeño de la temperatura del medio ocurre aceleración de la reacción a consecuencia de la activación de las moléculas del sustrato. A la vez, incluso un aumento pequeño dela temperatura de las enzimas, necesaria para la manifestación de su actividad catalítica.
Empieza gradualmente, la desnaturalización de la enzima cuando se acelera bruscamente la temperatura y estasobrepasa los 50°C. La inactivación de la enzima con aumento de la temperatura del medio es irreversible. Al bajar la temperatura la actividad de la enzima disminuye. El mecanismo de este proceso noestá claro sin embargo, el enfriamiento no causa desnaturalización de la enzima por lo tanto su inactivación puede ser reversible.





Objetivo:
El objetivo de la presente práctica esdemostrar el efecto de la temperatura sobre la glucosa oxidasa.
I. MATERIAL QUE DEBE TRAER EL ALUMNO
Agua destilada.
II. REACTIVOS Y MATERIALES BIOLOGICOS
4-Aminofenazona
Fenol
Agua destilada
Glucosaoxidasa (GOD)
Glucosa 100mg/dl
Peroxidasa (POD)

Hcl 0.01M
Na OH 0.01 M

III. PROCEDIMIENTO


1
2
3
Reactivo de trabajo (RT).
1ml
1ml
1ml
Llevar los tubos con (RT) Temperatura (°c )0
37
70
Incubar 10 minutos
*
*
*
Agregar glucosa
10 ul
10 ul
10 ul
Incubar 10 minutos a (°c)
0
37
70
LECTURA: Utilizar longitud de onda de 505nm.
0,321
1,051
0,394

0,680
1,3310,365




RESULTADOS:
























PRACTICA N° 4
EFECTOS DEL pH SOBRE LA GLUCOSA OXIDASA

FUNDAMENTO:

Para cada enzima existe un óptimo de pH en el quese crean las condiciones más favorables para el mantenimiento de la conformación funcionalmente activa de la molecular. Los grupos amino y carboxilo de los restos de aminoácidos ionizados a una...