Efecto de ph sobre velocidad de reaccion

Cambio en la ionización de residuos de aminoácidos implicados en la unión del
sustrato
• Cambio en la ionización de residuos de aminoácidos implicados en la catálisis
• Cambio en la ionización degrupos del sustrato**
• Cambio en la ionización de residuos de aminoácidos implicados en la estabilidad
de la enzima**
** Deben investigarse previamente a los estudios del efecto del pH sobre laactividad de
la enzima
EFECTOS DEL pH SOBRE ESTABILIDAD
versus EFECTOS SOBRE ACTIVIDAD
• Las proteínas son inestables a valores de pH extremos.
• Por esto, previamente a los estudios de los efectosdel pH sobre la actividad de
una enzima hay que determinar sus efectos sobre la estabilidad de esta enzima.
Para ello:
– Se incuba la enzima a diferentes valores de pH, en un intervalo amplio deéste, y por
un tiempo superior al tiempo del ensayo de actividad.
– Inmediatamente después de estas incubaciones se mide la actividad a un valor de pH
fijo y cercano a la neutralidad, en el que laenzima sea estable.
– Se grafican las actividades obtenidas frente al pH de incubación y se determina el
intervalo de pH en que la enzima es estable
• El estudio sobre la actividad se tiene quelimitar al intervalo de pH en que la
enzima es estable.
INTERÉS DEL ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE pH
SOBRE LA VELOCIDAD DE LAS REACCIONES
CATALIZADAS
• Determinar el pH óptimo de la reacción.
• Entendercómo cambios en el pH pueden regular la actividad de la
enzima.
• Identificar residuos de aminoácidos del sitio activo importantes ya
sea para la unión del sustrato, para los pasos químicos de lareacción o para ambos.
• Determinar el mecanismo químico de la reacción.
LOS H+ SON INHIBIDORES Y/O ACTIVADORES
• Los efectos de pH sobre la velocidad de la reacción catalizada son
el resultado dela activación o inhibición de la enzima por los H+.
• Pueden dar lugar a cualquier tipo de inhibición y activación.
• Sus efectos se pueden analizar por las mismas ecuaciones que
cualquier otro...