EFECTO DEL pH SOBRE LA GLUCOSA OXIDASA.

EFECTO DEL pH SOBRE LA GLUCOSA OXIDASA.












INTRODUCCIÓN

Para cada enzima existe un óptimo de pH en el que se crean las condiciones más favorables para elmantenimiento de la conformación funcionalmente activa de la molécula.

Los grupos amino y carboxilo de los restos de aminoácidos ionizados a una magnitud de pH determinada, participan en el mantenimiento dela conformación de la molécula proteínica necesaria para la confrontación de los censos catalíticos de la enzima y favorecen también a su ligación con el sustrato.

A magnitud del pH distinta sealtera la ionización de los grupos correspondientes, y como resultados se rompen los enlaces que aseguran la formación de los centros catalíticos, y la enzima se inactiva. A los valores del pH muy altoso muy bajos las enzimas se desnaturalizan.













OBJETIVO
El objetivo de la presente práctica es demostrar el efecto del pH sobre la glucosa oxidasa.
Materiales y reactivos
-Agua destilada.
- HCl 0.01 M.
- Glucosa.
- NaOH 0.01M
Equipos
- Pipetas.
- Espectrofotómetro.

PROCEDIMIENTO

1) El profesor nos dio a cada grupo un tubo de ensayo con el reactivo de trabajoy se especifico que hacer con cada tubo de los respectivos grupos de la siguiente manera.

GRUPOS
1,3
4,6
5,2
Reactivo de trabajo
1 ml
1 ml
1 ml
Agregar HCl 0.01M
0.1 ml
-
-
Agregar NaOH0.01M
-
0.1 ml
-
Homogenizar
*
*
*
Agregar glucosa (ul)
10
10
10
Incubar a 37ºC/10 minutos
*
*
*
Lectura: Utilizar longitud de onda de 505nm.

2) Luego de realizar el procedimientode acuerdo al recuadro anterior llevamos los tubos al espectrofotómetro para obtener la absorbancia.






RESULTADOS


GRUPOS
1,3
4,6
5,2
Reactivo de trabajo
1 ml
1 ml
1 ml
AgregarHCl 0.01M
0.1 ml
-
-
Agregar NaOH 0.01M
-
0.1 ml
-
Homogenizar
*
*
*
Agregar glucosa (ul)
10
10
10
Incubar a 37ºC/10 minutos
*
*
*
ABSORBANCIA
G1 = 0.64
G4= 0.44
G5 =0.82...